HITACHI7600全自动生化分析仪检测结果为负值的分析及处理方法

 随着全自动生化分析仪的普及，检验工作对设备的重视和依赖程度越来越高，因此，作为检验工作人员应当熟悉仪器的分析原理，在日常工作中仪器设备出现异常状况时，应该知道如何排查故障原因，做到及时处理，是现代检验人员工作能力和自身素质的良好体现。现介绍如下，供同行参考。

1.   检测结果出现负值的情况分类及原因分析

1.1  标本因素

1.1.1标本量过少

     常见现象为同一份标本多个检测项目出现负值，引起原因是使用分离胶负压试管且采血量偏少，因HITCHI7600采用的是电容式原理，样品针一旦接触到液面会继续下降1.5mm，当血清量少时，样品针会直接插入到分离胶或血细胞中，致使针堵塞，并影响下一个样本测试。处理方法：⑴将患者血清分离后用加样器转移到日立专用标准样品杯中；⑵本着对患者负责的态度，检验科应拒收不合格的检验标本，而临床科室应重新正确采集标本及时送检；⑶用无水酒精擦拭样品针金属部位，在执行一次排气处理，预防堵针。

1.1.2血清中有气泡，纤维蛋白原（FIB）

   此种情况见于某一份标本检测结果中多个项目测得结果为负值，原因是血清表面有气泡或者含有FIB，导致样品针吸空或堵塞。处理方法：⑴去除血清表面气泡；⑵将血清放置一段时间，待其凝固，并用干净竹签挑出FIB，重新离心；⑶肾功能衰竭做透析的患者血清往往呈高凝结状态，需延长温浴时间，多次离心，遇到此类情况应结合到临床再处理。

1.13标本脂浊

   常见现象为血清标本脂浊使某一些检测项目出现负值，原因是脂浊标本可以通过多种途径影响生化检测结果，包括：⑴由于标本粘度增大及CM的屏蔽效应，减少了抗原抗体结合几率，对免疫比浊法的项目造成很大影响；⑵脂浊血清中水分被不溶性的CM所取代，可使同一标本大多数检测项目产生负值（除TG少数项目外）；⑶脂浊血清对光线有一定的散射作用，使空白吸光度值升高，对吸光度产生正向干扰，直接影响比色，比浊分析法的项目测定，导致结果出现负值。处理方法：⑴用生理盐水稀释，可以降低样本空白，提高检测结果的准确性（但应注意其负面影响，如使样本粘度，张力等物理或化学特性发生机制效应变化，出现结果误差）；⑵将标本加盖密封，高速离心5min（5000r/min)，离心后血清可分为两层，吸取下层血清用来检测酶类的生化项目（一般PCR实验室配备，易于推广）

1.1.4 标本采集或保存不良

   不正确的标本采集或保存对一些特定项目如血糖有直接影响，使其结果偏低甚至负值。正常情况下，离体后Glu含量可下降5%-7%/h左右，即使是离心后的标本Glu浓度也会随着放置时间而呈进行性降低，平均降低1.4%/h。血浆仍对Glu有影响，这可能与红，白细胞的糖酵解有关。处理方法是在Glu测定时，尽量缩短样本分离时间，避免将血液标本放置37°C水浴箱中促凝，分离血清后尽快完成测定（草酸钾—氟化钠是最理想的Glu测定抗凝剂，但不适合其他生化项目），建议使用带促凝分离胶的真空采血管，并及时分离血清。肝素锂是可用于Glu测定抗凝剂，同时也适于其他大多数临床生化指标的测定。

1.2 试剂与人为因素

   常见现象为连续多份标本检测结果中某一检测项目出现多个负值，导致原因一是试剂失效，污染，这主要体现在试剂有颜色的检测项目（如TP，Alb，Mg，Ca，TBA，Cr苦味酸法）；二是人为放错试剂位置（如:ALT与ALP，TBil与DBil容易混淆）。处理方法;⑴定期检查试剂的效期与试剂颜色的变化，过期试剂进行特殊处理后弃去，对颜色变化的试剂及时更换；⑵更换批号的试剂进行定标；⑶检验人员应提高责任心，严格按照SOP文件进行操作；⑷经常更换试剂瓶，（一些检验工作人员在添加试剂时重复使用同一个试剂瓶，增加了污染概率）。

1.3 水质因素

   常见现象是离子类的血清检测项目出现负值，原因为水质电导率超标（电导率正常为1μs/cm（25°C））。处理方法：⑴取一次性塑料试管，加入1ml左右的Mg试剂（二甲苯胺蓝比色法），然后加入一，二滴水，5min后观察有无变化，如变成红色表明所用水中含有离子；⑵定期检查水质电导率及更换纯水机树脂，使纯水的水质在1μs/cm(25°C)以下。

1.4 仪器硬件故障

1.4.1 喷嘴堵塞

   常见于连续检测血清标本时出现多个负值（包括Rate A/END法的项目），导致原因为喷嘴及管路被反应物堵塞。处理方法：仪器处于Stand By 状态下，取下喷嘴，用含有5%NaCLO清洗剂的注射器用力推拉以除掉管壁的污物，再用无水酒精擦拭清洗机构的8只喷嘴（包括3.8号喷嘴小白块），并用通针疏通喷嘴，将1号喷嘴置于100ml 5%NaCLO清洗剂中，在Utility→Maintenance→Check→Mechanisms Check→Select→Module 选择模块（选中呈白色）→Cycles 50次→Execute 直至100ml 5%NaCLO清洗剂吸完。

1.4.2 SV21（负压电磁阀）闭合故障，负压不足

   常见现象为随机性的出现负值，但不会连续发生异常结果。导致原因是负压不足或者SV21内部腐蚀，生锈，致使其运动受限，闭合不严，造成清洗过程中间歇性不吸反应杯里的废液并污染周围反应杯。处理方法：⑴OFF仪器，用无水酒精分解檫试SV21与其相关的SV30,SV31各个内部组件；⑵经上述处理后，还出现负压报警，需更换负压泵膜（需工程师执行）。

1.4.3 光源灯与隔热玻璃劣化，恒温槽及反应杯脏污

   常见现象主要在一个批次Rate A法（酶类）的项目在反应过程中出现波折型曲线，致测定结果为负值。导致原因为光源灯与隔热玻璃劣化，恒温槽脏污或被絮状物覆盖，反应杯擦痕污迹从而阻碍光线从透光窗穿过。由于全自动生化分析仪大多用比色法，因此以上两个问题都会导致吸光度的检测出现偏差。处理方法：Stand By状态下，⑴执行Utility→Maintenance→Photometer Check→Select→选择模块（选中呈白色）→Execute，运行两次检测，两次测定需间隔10min，判断光源是否稳定，将两次光度计值作对比，正常光度计值340nm反应<19000,（如光度计灯值340nm处>19000需要更换光源灯，340与405nm光度计差值>3000，需要更换隔热玻璃）。更换光源灯时需待灯室冷却30min后，运行Utility→Maintenance→Change Light Source lamps 选择模块（选中呈白色）→Execute，更换完毕直接点击Stop；⑵擦拭透光窗时要谨慎，用无菌纱布清洗反应槽与过滤网，更换反应槽循环水，执行Utility→Maintenance→Inc.Water EXchg→Select 选择模块（选中呈白色）→Execute；⑶更换反应杯，更换前需将反应杯浸泡于2%Hitergengt溶液中2小时以上，安装时再用去离子水冲洗一次，执行Utility→Maintenance→Cell Blank→Select→选择模块（选中呈白色）→Execute。警记，凡是处理光路系统后都必须执行（Cell blank）测定。

1.4.4 Sample Probe 空吸或堵塞，Alarm Sample Short 现象为所有项目无法检测，而且连续性出现负值

   导致原因为Sample Probe 堵塞，Sample Probe与Sensor板劣化，H\V PCR脏污，G线通电不良。处理方法：⑴OFF仪器，用无水酒精擦拭H\V PCR，S.Probe 并用通针疏通，重做G线；⑵ON仪器，执行针位置确认与调整，确认针尖是否在样品杯中心，不经确认而直接执行有可能无法测得下降距离。执行水平调整运行Utility→Maintenance→Probe Adjust→Select→选择模块（选中呈白色）→S.probe（Horiz）→按F1键→Stop；垂直调整时在标准液用S样品针架（黑色）位置1，2上安装调整具，将样品架放置于样品供给部，运行Utility→Maintenance→Probe Adjust→Select→选择模块（选中呈白色）→S.probe（Vert）；⑶执行两次Utility→Maintenance→Air Purge→Select→选择模块（选中呈白色）→Execute，确认水是否从样品针的尖端笔直吐出。

2.结论

    HITACHI 7600全自动生化仪在检测标本过程中所出现的负值结果，其主要原因是没有做好日常维护保养工作。因此，在检验工作中，需要检验人员高度重视，认真负责，熟悉仪器的性能，做好一起日常维护保养工作，严格按照SOP操作，仪器才会处于最佳状态，为临床医生与患者提供快速，准确的检验报告，从而提高工作质量与检测水平。