【AASLD2023速递】O-糖基化M-HBsAg（HBsAgGi）有望成为监测慢乙肝患者治疗期间病毒动力学的新型生物标志物

编者按：第74届美国肝病研究学会年会（AASLD 2023）于当地时间2023年11月10日- 14日在美国波士顿召开。

HBsAg是HBV复制的关键血清标志物，HBsAg由大表面蛋白（LHBs）、中表面蛋白（MHBs）和小表面蛋白（SHBs），已有研究表明HBsAg的组成可预测HBsAg清除。近期，在AASLD2023大会摘要上发表的一项日本研究，表明初治慢乙肝患者中，基线HBeAg阳性患者的血清O-糖基化M-HBsAg（HBsAgGi）水平高于HBeAg阴性患者，HBsAgGi水平与HBV DNA水平呈显著相关。HBsAgGi有望用于监测慢乙肝患者治疗期间的病毒动力学。肝霖君与大家分享相关内容。

研究背景

HBsAg主要包括L-、M-和S-HBsAg。在HBV患者的血清中，非感染性颗粒明显多于含HBV DNA的感染性颗粒（Dane颗粒）。Dane颗粒含有全部HBsAg，但非感染性颗粒物主要含有S-HBsAg。因此，使用识别S- HBsAg的一般HBsAg检测无法完全区分感染性和非感染性亚病毒颗粒。由于识别O-聚糖的凝集素可以富集Dane颗粒，因此用质谱法测定O-糖基化的M-HBsAg。本研究旨在开发一种新的标志物检测方法用于检测含有O-糖基化M-HBsAg [HBsAg聚糖异构体（HBsAgGi）]感染性颗粒。

研究方法

为了产生HBsAgGi抗体，制备了O-聚糖修饰的糖肽。采用免疫印迹、免疫染色和酶联免疫吸附试验（ELISA）检测HBsAgGi抗体。为了表征HBsAgGi 目标颗粒，通过qPCR分析HBsAgGi抗体的免疫沉淀（IP）颗粒和逆转录PCR分别定量HBV DNA和HBV RNA。此外，还建立了一种新的HBsAgGi-ELISA系统用于检测慢乙肝（CHB）患者在核苷（NAs）治疗前后的变化，以探讨HBsAgGi的临床应用价值。

研究结果

含有或不含有聚糖的PreS2多肽可产生基因特异性抗体。对于C基因型，HBsAgGi抗体识别M-HBs，但不识别PreS2上未经O-聚糖修饰的L-HBs。O-糖基化位点突变或O-聚糖去除导致HBsAgGi抗体的识别能力下降。HBsAgGi定位于表达MHBs的细胞中的内质网（ER）至高尔基体，表明HBsAgGi通过糖基化途径产生。免疫沉淀实验证实，HBsAgGi抗体可识别含有HBV DNA和HBV RNA的病毒颗粒。在初治CHB患者中，基线HBeAg阳性患者的血清HBsAgGi水平高于HBeAg阴性患者。HBsAgGi水平与HBV DNA水平呈显著相关（p = 0.002，n = 32）。

研究结论

新的HBsAgGi抗体以基因特异性的方式识别HBV颗粒，这主要取决于PreS2结构域中O-聚糖的存在。HBsAgGi特异性存在于具有感染性的HBV颗粒中。结合患者的血清ELISA分析，HBsAgGi有望成为监测慢乙肝患者治疗期间病毒动力学的新型生物标志物。

肝霖君有话说

本研究表明新的HBsAgGi检测方法能够特异性识别HBV颗粒，在初治CHB患者中，基线HBeAg阳性患者的血清HBsAgGi水平高于HBeAg阴性患者。HBsAgGi水平与HBV DNA水平呈显著相关。HBsAgGi有望成为监测慢乙肝患者治疗期间病毒动力学的新型生物标志物。未来仍需要更多的研究探索其在慢乙肝患者治疗期间的动态变化，进一步验证HBsAgGi的临床应用价值。

参考文献：  

Angata K, Sogabe M, Narimatsu H, et al. Hepatitis B virus surface antigen glycan isomer (HBsAgGi) as a new glyco-biomarker to detect infectious HBV virions. AASLD2023, Abstract (1315-C).