如何确保免疫检测结果的可靠性？

什么是免疫干扰

在免疫检测中，比如 ELISA，CLIA 或者侧向流免疫检测中，嗜异性抗体 (HA)，人抗鼠抗体 (HAMA) 和类风湿因子 (RH) 会通过与抗体的非特异性结合而降低检测的灵敏度和特异性，导致错误结果和诊断。

因此，需要使用专门的免疫阻断剂来降低这些干扰引起的错误结果，提高免疫检测的准确性和特异性。 

什么是免疫阻断剂

阻断剂是用于中和免疫诊断检测中由HAMA、RF和HA产生的干扰。迈迪安提供多种阻断剂配方，可用于ELISA、侧向流免疫层析和CLIA的不同应用。

为什么需要使用免疫阻断剂

由于患者样本中存在多种异嗜性抗体，免疫阻断剂在开发临床免疫诊断时是必不可少的。弱交叉反应抗体如HAMA和RF会干扰检测，导致假阳性或假阴性结果。

真正的阳性结果

在真正的阳性结果中，检测抗体能够与患者样本中的抗原自由结合。阻断剂的作用是与干扰物质结合，消除其可能导致错误结果的可能性。假阴性结果

在假阴性反应中，异嗜性抗体与检测中的抗体结合，阻止它们与患者样本中的靶抗原结合。患者样本为阳性，但检测结果为阴性。

假阳性结果

在假阳性反应中，异嗜性抗体以类似于靶抗原的方式与检测抗体结合。尽管患者样本为阴性，但检测结果为阳性。

阻断剂有哪些不同类型

Tru Block

独特的异嗜性抗体阻断剂，独家专利的配方可去除多种不同类型的异嗜性干扰，包括HAMA和RF。

动物IgG

动物IgG(如小鼠IgG)适用于阻断异嗜性抗体，特别是在混合种检测中(如MAb/PAb)。阻断剂的来源必须与宿主抗体的来源相同。

IgG阻断剂

患者样本中过量的IgG抗体会干扰IgM检测，迈迪安的羊抗人IgG和IgM检测稀释剂可用于提高IgM检测的灵敏度。

迈迪安阻断剂产品线

Tru BlockTM经验证的

检测结果

三个不同的双鼠单克隆夹心检测（商业CA19-9, 商业FSH 和内部RF实验）被用来比较TRU Block:trade_mark:，小鼠IgG 和另一个竞争对手S的主动HAMA阻断剂的性能。

为了量化每个人血清中HAMA或RF活性的相对含量，实验中使用了不含小鼠IgG和其他阻断剂的稀释缓冲液，按照制造商的使用说明进行实验。

含有TRU Block:trade_mark: ，小鼠IgG或者竞争阻断剂的阻断液使用同样的稀释缓冲液各制备了四个不同浓度 (5 μg/ml,2.5μg/ml，1.25 μg/ml 和0.625 μg/ml)。

通过相对抑制HAMA或者RF信号 （即比较没有阻断剂的样品和有各种阻断剂的样品的吸光度）来决定各种阻断剂的有效性。

HAMA阳性血清来自于Scantibodies(SD386-1)和 BioReclamation (BRH56382). 另一个样本来自于罗氏 (罗氏 Type 1)，含有罗氏专有HAMA的普通人类血清。RF血清样品由迈迪安公司内部提供，产品编号为 A12916H 和A01270H。

研究结果表明，在所有测试的HAMA和RF血清样本中，TRU Block:trade_mark: 的性能相当于或者优于竞争对手的主动阻断剂。干货如何确保免疫检测结果的可靠性？

为什么免疫诊断检测中要使用免疫阻断剂，如 TRU Block和小鼠 IgG?

A:用于体外诊断(IVD)的免疫检测中通常使用动物来源的抗体来识别特定的疾病标志物。 病人血液存在的抗体，在免疫检测中可能与动物抗体发生反应，而引起错误的结果。 虽然出现这些干扰的概率很低，但一旦出现假阳性结果对诊断检测的质量和竞争力会造成负面影响，对那些误诊的病人也将带来重大的负面影响。

Q有哪些最常见的抗体干扰?

A: 人抗鼠抗体 (HAMA)是夹心法和竞争法检测中最常见的会引起假阳性或假阴性的抗体干扰，因为小鼠单抗是诊断检测中最常用的抗体。小鼠IgG可以阻断患者血清样本中的HAMA。

QHAMA是唯一一种异嗜性抗体干扰吗 ?

A: 不是的。HAMA仅代表一种类型的异嗜性抗体(HA)干扰——其他包括HA对其他动物动物，如山羊(HAGA)、绵羊(HASA)和兔子(HARA)的干扰，当使用来自这些动物的抗体进行免疫检测时，也可能会导致错误的结果。 除了HA，还有另一类干扰称为类风湿因子(RF)，这是一种自身抗体，与患者自身的免疫球蛋白(Ig)反应，可以与动物Ig交叉反应，类似于HA/HAMA干扰。

Q什么是类风湿因子(Rheumatoid Factor ,RF)?

A: 类风湿因子是一种针对IgG Fc部分的自身抗体(通常为IgM)。 它在患有类风湿的人群中很常见，约有一半的类风湿患者会出现这种情况，但在没有类风湿关节炎的人群中，大约每20人中就有1人的类风湿因子水平较高，在老年患者中更常见。

Q类风湿因子(RF)如何干扰免疫检测呢?  

A: RF类似于异嗜性抗体，即使在没有分析物的情况下，也有可能通过交联检测抗体而导致错误的检测结果，它通常是通过与检测抗体的Fc部分结合。RF可对不同种类的IgG产生反应，包括人IgG和兔IgG。

Q如何在免疫检测中使用小鼠或山羊IgG?  

A: 我们的建议是:

a)使用与捕获或检测抗体宿主相同种类的阻断剂; 

b) 小鼠或山羊IgG的浓度是用于测定的MAb/PAb浓度的10倍。 (例如，如果检测中使用5ug/mL的抗体/共轭物，那么加入50ug/mL的动物IgG) 。