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ARCH PATHOL LAB MED:延迟固定和固定时间对核酸质量影响的比较

2019-10-24 MedSci MedSci原创

尽管福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)组织在临床和研究中得到广泛应用,但不同组织处理的潜在影响仍是未知的。为了阐明与临床相关的分析前变异相关的分子效应,美国国家癌症研究所发起了生物样本分析前变量(BPV)计划。

尽管福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)组织在临床和研究中得到广泛应用,但不同组织处理的潜在影响仍是未知的。为了阐明与临床相关的分析前变异相关的分子效应,美国国家癌症研究所发起了生物样本分析前变量(BPV)计划。

BPV计划是一系列系统、盲法和随机对照研究,研究与病例配对的速冻对照相比相比,固定时间延迟(DTF)或固定时间(TIF)是否影响从FFPE结肠、肾脏和卵巢肿瘤中分离出的DNARNA的数量和质量。

研究发现,在不同的DTFTIF时间点下,FFPE生物样本的DNARNA产量具有可比性。DNARNA质量指标显示了DTFTIF在检测和时间点上的特异性作用。定量逆转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)方法在评估RNA质量方面更有优势,可以持续检测FFPEsnap-frozen生物样本之间的差异,以及DTFTIF时间点之间的差异。RNA完整性数和DV200(表示RNA片段长度超过200个核苷酸的百分比)显示出敏感性较为有限。用基于qPCR的方法可检测FFPEsnapfreeze biospecimens之间、DTFTIF时间点之间的DNA质量(Q-ratio)差异。

在某些肿瘤类型中,12小时DTF72小时TIF可能会对DNARNA质量产生不利影响。本文的结果以及正在进行的其他BPV分子分析的结果将有助于确定可接受的延迟和最佳固定时间。

原始出处:

Latarsha J. Carithers, PhD; Rachana Agarwal, PhD;The Biospecimen Preanalytical Variables Program: A Multiassay Comparison of Effects of Delay to Fixation and Fixation Duration on Nucleic Acid Quality

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