敢说敢言：一线病毒学科技工作者的再建议
2020-02-03 周荣 “南山呼吸”微信公众号
即使我们湖北各地封城了，大量相关人员隔离了，还是有病例在多地、多国不断出现。提示这次病毒感染性很高，并可气溶胶空气传播，特别是疑似病人早期没有症状仍然有排毒的可能，防控难度大。所以，我们可有疫情很快结束、永不再来的美好愿景，也要有可能持久、季节性流行的最坏打算，故特此再次呼吁所有相关专业的资深专业人士必须全员努力、争分夺秒、共克时艰！以下是我对防控诊治相关方向与技术的一些建议和研发思路，现全部
即使我们湖北各地封城了，大量相关人员隔离了，还是有病例在多地、多国不断出现。提示这次病毒感染性很高，并可气溶胶空气传播，特别是疑似病人早期没有症状仍然有排毒的可能，防控难度大。所以，我们可有疫情很快结束、永不再来的美好愿景，也要有可能持久、季节性流行的最坏打算，故特此再次呼吁所有相关专业的资深专业人士必须全员努力、争分夺秒、共克时艰！
以下是我对防控诊治相关方向与技术的一些建议和研发思路，现全部公开，供大家参考、借鉴。目的希望社会各界能齐心协力，共同为防疫科技、产品攻关，快速投入使用，造福人类！
关于院感防控，核心点应该是“单人隔离、及时消除”
1.居家隔离
单人单间，照顾家属尽量不要靠近患者，房门常关，房间内可配置一台空气净化消杀器或空气净化器并保持开机，若有可能亦可放一个二氧化氯缓释产品。最理想可以在窗户上装一个外排式窗式净化器。
2.集中隔离（非中央空调、非封闭式建筑物，要易通风）
单人单间，照顾者尽量不要靠近患者，房门常关，房间内可配置一台空气净化消杀器械或空气净化器并保持开机，亦可加放一个二氧化氯缓释产品。最理想应在窗户上装一个外排式窗式净化器。
3.医院病房
应尽量是独立的建筑物、切不可夹在其他病区中间；有两区三通道、气流从中间入房间再出病人走廓或经窗式净化消杀器械排出的专用病房则最好，总的原则是未检出阳性疑似者应单间；同种病原阳性者可同间安排、每一个床头尽可能安放一个合适的负压过滤净化屏（有消杀功能则最好）或类似装置，持续低档运行。
条件不具备时亦可房门常关，房间内可配置一台空气净化消杀器械或空气净化器并保持开机，可加放一个二氧化氯缓释产品。最理想则应在窗户上装一个外排式窗式净化器。
有关诊断试剂的开发与应用规范
1.咽拭子采样
咽拭子采样后立即放入到2-3M的异硫氰酸胍或盐酸胍病毒裂解液（就是常用核酸提取试剂A液），迅速将病毒彻底灭活，解除样本采集后转运、实验室操作过程中的生物安全问题。所有医院、检测实验室都不应该用病毒培养液采取及保存标本，裂解后的核酸样本可以降低管控级别，积极用于相关科研或试剂评价工作中。而在拭子材质、粗细选择上建议要先作效果评价。
2. 样品选择问题
到底是咽拭子、还是唾液、深部咳痰、血液？各种样本在什么时间检出率最佳？请有条件的科技攻关实验室尽快抓紧做、并及时公布，共同提高检验品质。
3.新冠状病毒核酸检测方法和评价
以荧光探针法PCR检测为主，只要检出符合率达到90%以上均可以临检应用。应该提供抗疫应急供货价！及加快公开竟价采购机制以提供性价比合适的产品满足抗疫需要。针对新冠状病毒任何一个基因位点检出阳性都可以判定为初筛阳性，可以在时间充裕时再作回顾性验证或复检。
4.实验室检测质量管控
在荧光探针法PCR技术实验操作无需硬性要求一定要在PCR认证实验室中进行，因为PCR污染问题主要是扩增后产物污染，原来要求三区3或4室的PCR实验室认证是大约90年代初在普通PCR扩增凝胶电泳法时代提出来，至今未变。其实荧光PCR技术应用后这个“严格物理分区”管理方法就没有必要，应该与时俱进、科学更新了。因为荧光PCR核酸检测方法是不开盖的实时检测技术，无需再作产物单独分析，只要反应管不泄露（可以加入15-30uL石蜡油封盖反应液可更保险），那么最多两间相对独立的房间或一个大房间分两个区就可以了。样本处理（因已是裂解了的核酸样本）可在一个通风橱中进行、加试剂及样品就在PCR仪（亦可放在稍有负压的排风柜中或易于通风的台面上）傍边即可（现在试剂都基本是简便型的，厂家都配制好了、只需操作一两步就可以了）。样本处理和加样反应可以由两个不同的人操作，防荧光PCR检测污染，人员分工和科学通风比物理分区更科学，防产物污染造成假阳性主要是在“心中有数”！质量控制室间抽查、评价可能更合理。
5.加快特异性抗原、抗体检测试剂研发
应加快组织专家研发特异性抗原、抗体检测试剂。抗体检测应抓紧应用于临床，作辅助鉴定或回顾性流行病学调查，这对现时的疫情防控十分有用。如是患者已康复，并检测出特异抗体阳性，那么他就是对新冠病毒有抵抗力的“贵人”了，他可以去血液中心义务献血救治重症病人；亦可以加入到协助采样等需求密切接触病人的工作来，因他已对该病已有抵抗力。建议抓紧研究、评估及做预案。
6.加大各类（包括后续产生抗体）人群的抽样检测力度
在条件具备时要加大力度对各类人群的检测，包括因感染新冠病毒感染后痊愈并后续产生抗体的人群进行抽样检测，以便相对及时或准确地掌握该病流行和发生情况，为未来疾病控制、预警、疫苗和药物研发提供依据和指引，这很重要！
有关疫苗和抗病毒药物研发
1.抓紧疫苗研发
就目前该病毒流行的进度判断，其疫苗的研发十分重要，远比SARS、MERS等更有必要性，可能是最终的解决方案。从安全的角度讲，VLPS、腺病毒载体、其它基因工程、灭活疫苗、减毒或复制缺陷型等都应分头攻关。
2.经费支持
建议竞标选择较有综合实力、研发成功且技术比较靠谱的（科学家可以与相关生产企业合作，形成产学研一体化合作）的团队以“后补助或者无息贷款方式”支持，以提高相关研发工作的成功率和转化效率。
以上一家之言、仅供参考，不对之处、欢迎大家批评指正！
写于2020年1月28日星期二6：45湖北黄冈
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