Clin Chem：血清甲氨蝶呤定量质谱分析的多点内部校准如何？
2020-04-05 MedSci原创 MedSci原创
临床LC-MS/MS分析传统上要求样品分批进行，每个批次都有校准曲线。这种方法效率很低，并且对随机访问分析造成了障碍。我们开发了一种替代方法，称为多点内部校准，避免了对批处理模式分析的需要。
临床LC-MS/MS分析传统上要求样品分批进行，每个批次都有校准曲线。这种方法效率很低，并且对随机访问分析造成了障碍。我们开发了一种替代方法，称为多点内部校准，避免了对批处理模式分析的需要。
新的方法使用4种13C标记的甲氨蝶呤变体(0.026-10.3µM)作为每个样品的内部校准曲线。其中一个站点进行了全面的验证，包括干扰和基质效应的评估、定量下限(LLOQ)和20天的精度。三个位点评价了测定的精度和线性度。并与传统的LC-MS/MS及免疫分析方法进行了比较。
研究结果显示，加标分析物的回收率为93%-102%。 验证LLOQ为0.017µM。 在20天的实验中确定的总变异性为11.5%CV。 在每个位点进行的5天变异性研究中，总不精确性为3.4至16.8%CV。 在校准范围内(R2>0.995，斜率=0.996-1.01)验证了线性。 在比较每个实验室运行的40个样本时，实验室间不精确性中位数为6.55%CV。 MPIC定量与传统的LC-MS/MS和免疫分析(R2=0.96~0.98，斜率=1.04~1.06)相当。 当MTX浓度>0.4µM时，对所有比较的Bland-Altman分析显示偏差很少超过20%。
研究结果表明，血清甲氨蝶呤定量的MPIC方法在多点概念证明研究中得到了验证，代表了向随机存取LC-MS/MS分析迈出的一大步，这可能改变临床实验室质谱的模式。
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