诺贝尔生理或医学奖得主山中伸弥的成长之路

    10月8日 ，诺贝尔医学奖评委会秘书长约兰·汉松在众人的期待下宣布：“ 2012年诺贝尔生理学或医学奖授予英国医学教授约翰·格登和日本医学教授山中伸弥，以表彰他们在“体细胞重编程技术”领域做出的革命性贡献。”

　　于是，京都大学教授山中伸弥成为第19位获得诺贝尔奖的日本人，同时也是第 2 位获得诺贝尔医学或生理学奖的日本人。这样一位伟大的科学家，其成长之路有诸多亮点，让我们一起来看看吧。

　　成长之路

　　1962年9月4日 ，山中伸弥出生于日本大阪府。大一之前，山中伸弥都一直居住在奈良市。高中时，山中因阅读医师德田虎雄的着作《只有生命是平等的》而倍受鼓舞，决定从医。

　　山中的父亲经营着一个生产裁缝机零配件的小工厂。虽然山中小时候也喜爱分解机械，但常常无法将其恢复原样，受到父母的责备。机械道路上的不顺利，成为山中迈上医学道路的另一个诱因。

　　在父亲的影响下，他立志认真学习终于考入大阪重点中学--大阪教育大学附属天王寺高中，考入高中后其他学生都在认真学习，只有山中热衷于柔道（据说他有梦想成为日本奥运会代表选手），在高中的3年期间他因为练柔道就受伤了10多次（骨折），很多人都说这个孩子大概走错了学校，应该去考大阪体育大附属高中，而不是在这里学习文化知识，三年时间很快就要过去，这个失败的学生将如何面对人生呢？山中伸弥的父亲告诉他：你多次受伤，看见医生这么为病人减轻痛苦，你将来要成为医生为人类服务。于是山中就接受了父亲的提议，在学校的最后阶段认真学习，终于考入了着名的国立神户大学医学部。

　　46岁的山中伸弥喜欢整洁，像一位军人。在日本京都大学前沿医学研究所，我看到了他的办公室：很小很简陋，但出奇的干净整洁。站在办公室里，你很难把这间屋子的主人与万众瞩目的iPS细胞联系在一起。不过，也许在未来某一天，这间办公室会多出一枚代表科学界至高荣誉的诺贝尔奖章。山中伸弥扫视了一下自己的办公室，对我说：“就在办公室下方10米，有一个房间我从来没有进去过，因为没有政府的许可，我无权进入。在那间屋子里，存放着日本境内唯一一个取自人类胚胎的干细胞系。”

　　尽管在名义上，日本政府允许使用胚胎干细胞，但实际操作中，人类胚胎干细胞的获取和使用都受到非常严格的限制。为了获准使用胚胎干细胞，研究人员往往要花费一年的时间，来办理各种申请手续。

　　研究之路

　　在日本，不仅科学氛围沉闷，研究人员还受到很多规则的束缚。不过，山中伸弥却意外成为这种科学文化的受益者。最初，他只是大阪的一位整形医生。20世纪90年代中期，他决定前往美国格拉德斯通心血管疾病研究所（Gladstone Institute of Cardiovascular Disease）做博士后，从事小鼠癌症相关基因的重编程研究。到那里后，山中伸弥发现美国简直就是“天堂”，不仅容易接触到胚胎干细胞系，并且经费充足，可以和很多顶尖科学家交流。而在日本，他四处碰壁。山中伸弥回忆道：“做完博士后研究回到日本时，我丧失了全部动力。资金少得可怜，优秀科学家屈指可数，我还得亲自饲养近1,000只小鼠。”

　　他陷入绝望，险些放弃研究重回手术室。但有两件事激励着他继续留在科学界：一封邀请函不期而至，邀请他担任日本奈良科技研究所一个小实验室的负责人；美国威斯康星大学麦迪逊分校的詹姆斯·汤姆森（James Thomson，另一个制造iPS细胞的研究组的负责人）分离出了第一代人类胚胎干细胞。

　　汤姆森分离出胚胎干细胞后，很多研究人员试图控制这些细胞，让它们分化为特定细胞类型，以替代病变或受损组织，从而改进现有医疗手段。山中伸弥说：“对于这样的研究，我们实验室根本不具备竞争力，所以我想，反其道而行之或许是条出路——不是让胚胎干细胞变成什么，而是让别的东西变成胚胎干细胞。”1997年，英国科学家伊恩·威尔穆特（Ian Wilmut）成功克隆出多利羊，给了他很大的启发：“我们从中了解到，即使是完全分化的细胞，也能回到类似胚胎干细胞的状态，但我们同时也认为，要实现这个目标，需要漫长的研究过程——可能要花二、三十年。”

　　然而，山中伸弥只花了不到10年时间。为了解决胚胎干细胞研究中的两个关键问题，山中伸弥变得干劲十足。一个是细胞来源问题。他曾参观过一个朋友的生殖学实验室，在显微镜下看到了早期胚胎。尽管他强调不反对利用胚胎干细胞拯救病人，但脆弱的初生生命仍打动了他；另一个问题是，胚胎干细胞移植到人体时，免疫排斥可能危害健康，而来自病人自身的iPS细胞分化出的细胞，就不会产生这样的副作用。

　　山中伸弥开始研究小鼠胚胎细胞如何保持多能性，以便能分化成身体里的任意细胞类型。他猜测，小鼠胚胎可能含有一些特殊蛋白质，这是成熟细胞所没有的。如果将相应基因（尤其是控制其他基因活性的转录因子的基因）插入普通皮肤细胞的染色体中，也许就能使皮肤细胞转化为胚胎干细胞。

　　经过4年的试验，他发现了24个因子，将它们转入普通小鼠的成纤维细胞，并经过合适的培养步骤后，就可以生成与干细胞相同的多能细胞。山中伸弥检测了每一个因子，发现任何因子都无法单独发挥作用，只有4种因子的组合才能完成这一任务。2006年，他在《细胞》（cell）杂志上发表了一篇里程碑式的论文，介绍了编码上述4种因子的基因：Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4。

　　这篇文章震惊了全世界，也促使科学家产生了更为大胆的想法：人类细胞是否也能像小鼠细胞一样重返干细胞状态？2007年，山中伸弥和汤姆森的研究小组几乎在同一时间宣布，他们利用此前发现的4种转录因子（分别由Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4编码），成功制造出人类iPS细胞。尽管汤姆森表示“我们的实验非常简单，很容易得到相似结果，”但其他科学家仍然认为，这一重大突破好比点石成金。

　　此后，科学家纷纷放弃胚胎干细胞研究，转而进行成熟细胞的诱导工作。目前，山中伸弥和其他研究小组已把多种组织（包括肝、胃和大脑）的细胞，转变成了iPS细胞，并让iPS细胞分化成了皮肤、肌肉、胃肠道、软骨、能分泌神经递质多巴胺的神经细胞以及可以同步搏动的心脏细胞。

　　不过，两个安全隐患决定了iPS细胞无法在短时间内进入临床应用。c-Myc除了编码转录因子，还有另外一种身份：癌基因，而山中伸弥制造的iPS细胞也确实容易发生癌变。他解释说：“制造iPS细胞就像在制造癌症。”其实，制造iPS细胞可以不需要c-Myc：山中伸弥和美国麻省理工学院的鲁道夫·詹尼士（Rudolf Jaenisch）发现，如果优化细胞培养条件，即使不使用c-Myc，也能将小鼠细胞转化为iPS细胞。为了比较含有和不含c-Myc的iPS细胞的安全性，山中伸弥将两类细胞分别移植到100只小鼠体内。结果发现，100天后，接受不含c-Myc的iPS细胞的小鼠无一死亡，而另外100只小鼠则有6只死于癌症。

　　第二个安全隐患来自基因载体——逆转录病毒（retroviruses）。利用这类载体向细胞插入基因，会使生成的干细胞充满病毒。而且，逆转录病毒还可能诱导细胞突变，导致癌症。不过，科学家很快就会解决这个难题。2008 年9月，哈佛大学干细胞研究所的一个研究组宣布，他们用腺病毒作为载体，制造出了小鼠iPS细胞。1个月后，山中伸弥又用质粒（即环形DNA片段）携带基因，成功制造出iPS细胞。逆转录病毒的其他替代品还有蛋白质和脂质分子。

　　尽管在利益的驱动下，iPS技术发展非常迅速，各大实验室也在争相完善这门技术，但山中伸弥并不认为iPS细胞现在就可以取代胚胎干细胞。美国马萨诸塞综合医院再生医学中心的康拉德·霍切林格（Konrad Hochedlinger）说：“我们还不知道胚胎干细胞与iPS细胞是否真的完全相同。目前，iPS细胞只是多能细胞的一种补充来源，要彻底取代胚胎干细胞，它必须经受时间的考验。如果现在就得出结论，显然为时过早。”

　　在坚持认为iPS细胞距离实际应用还有相当距离的同时，山中伸弥也高调宣称这类细胞对于治疗糖尿病、脊髓损伤、帕金森病甚至失明具有巨大潜力。日本理化研究所发育生物学实验室主任西川伸一（Shinichi Nishikawa）评价道：“这一激动人心的发现为再生医学和细胞治疗技术都提供了一个清晰的发展框架。”

　　未来5年，山中伸弥将带领20位研究人员，寻找应用iPS细胞预测药物副作用的方法，解决毒理学中的一些难题，并阐明某些疾病的发病机制。虽然他的伟大发现让全球科学家感到无比兴奋，也给生物医学领域带来了无数可能，但这位曾经的医生依然非常谦虚和谨慎：“我们还有许多基础性工作要做，比如确保iPS细胞的安全性。这不是奥运会中的国际竞争，而是国际合作。现在，我们的所有工作都只是一个开头。”

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