Clin Chem：使用数字PCR 快速测量RHD

近日，国际杂志 《Clinical Chemistry》上在线发表一项关于使用数字PCR 快速测量RHD的研究。

父亲的接合性测试用于确定胎儿和新生儿妊娠中溶血病风险的RHD的homo-或半合子。目前，关于这种测试是通过使用实时PCR或Rhesus box PCR 实现的，然而目前这可能难以解释和不可靠的，特别是针对于非洲黑人群体。

本研究采用2个RHD特异性靶标对照参考（AGO1）2的多重反应分析从53名献血者提取的DNA样品，以通过数字PCR确定基因量。将结果与血清学数据进行比较，通过长程PCR（LR-PCR），下一代测序和常规Sanger测序确定2个不一致结果中的正确基因型。

使用数字PCR，结果显示RHD接合度清晰可靠，并显示4个样品与血清学预测基因型不符。下一代的Sanger测序和长距离PCR测序显示，样品729M和351D的正确基因型为血清型R1R2（DCe/DcE）,729M的电位为R 2 r'（DcE/dCe），351D的电位为R1r“（DCe/dcE），R0r^y（Dce/dCE）或R Z r（DCE /dce）与数字PCR数据一致。

研究发现，数字PCR提供了一种高度准确的方法来快速定义血型接合性，并在Rh表型或基因型样品的分析中具有临床应用。目前的绝大多数血型基因分型平台并不旨在界定接合性，因此，该技术可用于定义胎儿和新生儿溶血性疾病风险的妊娠中的父系RH结合性，并能区分homo-和半合子RHD阳性个体。

原始出处：

Kelly A. Sillence, Amr J. Halawani, Wajnat A. Tounsi,et al. Rapid RHD Zygosity Determination Using Digital PCR

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