Cytokine:重组慢病毒介导的BMP2和TGF-β3对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的协同作用
2019-04-29 不详 网络
骨髓间充质干细胞(BMSCs)是骨工程中种子细胞的良好候选者。该研究旨在研究人骨形态发生蛋白2(hBMP2)和转化生长因子β3(hTGF-β3)修饰的BMSCs在体外诱导成骨分化中的协同作用。本研究构建携带hBMP2和/或hTGF-β3基因的慢病毒(LV)并用于转导大鼠BMSCs。通过qRT-PCR和蛋白质印迹检测成骨基因及蛋白的表达。靶向基因经PCR扩增并通过DNA测序和BLAST分析确认。被载
骨髓间充质干细胞(BMSCs)是骨工程中种子细胞的良好候选者。该研究旨在研究人骨形态发生蛋白2(hBMP2)和转化生长因子β3(hTGF-β3)修饰的BMSCs在体外诱导成骨分化中的协同作用。本研究构建携带hBMP2和/或hTGF-β3基因的慢病毒(LV)并用于转导大鼠BMSCs。通过qRT-PCR和蛋白质印迹检测成骨基因及蛋白的表达。
靶向基因经PCR扩增并通过DNA测序和BLAST分析确认。被载体感染的BMSCs有效地导致hBMP2和hTGF-β3的过表达以及培养上清液中更高水平的hBMP2和hTGF-β3。hBMP2和hTGF-β3的共转导较单独转导hBMP2或hTGF-β3更有效地诱导BMSC成骨分化。 LV-hBMP2 + LV-hTGF-β3组(分别携带hBMP-2基因和hTGF-β3基因的载体转染的BMSCs)和LV-中骨桥蛋白(OPN),骨钙蛋白(OCN)和骨保护素(OPG)的表达水平hBMP2-hTGF-beta3组(携带hBMP2和hTGF-β3融合基因的载体转染的BMSCs)明显高于LV-BMP2(携带hBMP2基因的载体转染的BMSCs)和LV-TGF-β3(携带hTGF的载体转染的BMSCs -beta3基因)组(P <0.05)。hBMP2和/或hTGF-β3过表达上调碱性磷酸酶(ALP)活性。
总之,本研究表明,hBMP2和/或hTGF-β3基因可在BMSCs中成功过表达。我们的研究证明,两种细胞因子(hBMP2和hTGF-β3)可以协同诱导骨分化,预计这两种细胞因子的组合将来作为一种治疗策略。
原始出处:
He W, Chen L, et al., Synergistic effects of recombinant Lentiviral-mediated BMP2 and TGF-beta3 on the osteogenic differentiation of rat bone marrow mesenchymal stem cells in vitro. Cytokine. 2019 Apr 13;120:1-8. doi: 10.1016/j.cyto.2019.03.020.
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