J Ethnopharmacol：固本泻浊汤通过Raf1/p-Elk1信号轴抑制M1极化，减轻肾间质纤维化

背景：固本泻浊汤(GBXZD)是一种在中医指导下用于治疗慢性肾脏疾病(CKD)的复方中药，其主要成分为黄芪、党参、积雪草、丹参、菟丝子、大黄。临床研究表明，GBXZD可缓解患者疲劳、恶心等症状，改善肾功能；但其具体作用机制还有待进一步阐明。

肾间质纤维化(RIF)是各种CKD的最终特征性表现，无法治愈，需要进一步探索合适的治疗方法来延缓其进展。GBXZD在临床上广泛应用于RIF治疗，可有效缓解CKD患者的症状。然而，GBXZD在RIF中的具体作用机制尚不清楚，需要进一步研究。该研究旨在通过对M1巨噬细胞的调控，探讨GBXZD对RIF的特异性作用。

方法：通过单侧输尿管梗阻(UUO)建立体内RIF模型，将SD大鼠随机分为假手术、UUO、UUO + GBXZD -低剂量组(GBXZD-L)和UUO + GBXZD -高剂量组(GBXZD-H)。

采用苏木精和伊红(HE)染色及Masson染色观察大鼠肾脏的病理变化。免疫组化法检测大鼠肾组织中Ⅰ型胶原(COL I)、纤维连接蛋白(FN)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、白细胞介素-1β (IL-1β)、白细胞介素-6 (IL-6)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)的表达，免疫荧光法检测CD86和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达。

体外实验采用脂多糖(LPS)诱导RAW264.7巨噬细胞M1极化模型。细胞分为对照组、LPS组、LPS + GBXZD低剂量组(GBXZD-L)和LPS + GBXZD高剂量组(GBXZD-H)。采用western blotting、流式细胞术、免疫荧光和酶联免疫吸附法(ELISA)检测CD86、iNOS、IL-1β、IL-6和TNF-α的表达变化。利用抗体芯片分析了GBXZD调节巨噬细胞M1极化的作用途径，并用western blotting对结果进行了验证。

结果：组织病理学结果显示，与假手术组相比，UUO组表现出明显的纤维化损伤。治疗后肾损伤程度、RIF、炎症因子表达均低于UUO组。与LPS处理的细胞相比，LPS + GBXZD处理的RAW 264.7细胞M1标记物CD86、iNOS和通路蛋白Raf1、p-Elk1的表达下调。LPS组炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α的表达均高于对照组。然而，与LPS组相比，GBXZD-H组这些因子的水平显著降低。

结论：该研究表明，GBXZD改善RIF，抑制炎症反应和巨噬细胞M1极化的可能机制与下调Raf1和p-Elk1有关。因此，GBXZD对CKD患者具有潜在的治疗价值。

原始出处：

Liu Y, Wu J, Liang S, et al. Guben Xiezhuo decoction inhibits M1 polarization through the Raf1/p-Elk1 signaling axis to attenuate renal interstitial fibrosis [published online ahead of print, 2023 Sep 14]. J Ethnopharmacol. 2023;117189. doi:10.1016/j.jep.2023.117189