Stem Cell Res Ther：浓缩生长因子在牙髓再生中的潜在应用
2019-05-25 不详 网络
已知浓缩生长因子（CGF）作为天然生物材料含有血小板，细胞因子和生长因子以促进愈合过程，但在再生牙髓病学中获得的信息很少。本研究旨在探究CGF对体外暴露于脂多糖（LPS）的人牙髓细胞（hDPSCs）增殖，迁移和分化的影响及其在体内未成熟牙髓再生中的潜在作用。通过冷冻干燥法提取CGF，分离并鉴定hDPSC。通过细胞计数试剂盒-8评估具有不同浓度的CGF和LPS的hDPSC的增殖潜力。通过Transw
已知浓缩生长因子（CGF）作为天然生物材料含有血小板，细胞因子和生长因子以促进愈合过程，但在再生牙髓病学中获得的信息很少。本研究旨在探究CGF对体外暴露于脂多糖（LPS）的人牙髓细胞（hDPSCs）增殖，迁移和分化的影响及其在体内未成熟牙髓再生中的潜在作用。
通过冷冻干燥法提取CGF，分离并鉴定hDPSC。通过细胞计数试剂盒-8评估具有不同浓度的CGF和LPS的hDPSC的增殖潜力。通过Transwell测定分析迁移能力，通过使用ALP染色测量碱性磷酸酶（ALP）活性来确定牙齿/成骨细胞分化，并且通过使用茜素红S染色来评估矿化程度。通过定量聚合酶链反应（qPCR）测定DMP-1，DSPP，OPN，Runx2和OCN的mRNA表达水平。体内实验中个，CGF用作比格犬中未成熟单根牙的根管充填剂。然后对牙齿进行射线照相，提取，固定，去矿化，并在8周时进行组织学分析。通过苏木精-伊红（HE）和Masson三色技术评价新形成的牙本质-牙髓复合体和根尖孔的发育。通过血管内皮生长因子（VEGF）和巢蛋白的免疫组织化学染色分析软组织。
体外实验结果显示，培养的细胞表现出间充质干细胞的特征。LPS处理明显增加hDPSCs中TNF-α，IL-1β，IL-6和IL-8的表达，CGF抑制LPS刺激的hDPSCs中IL-8的mRNA表达。从第3天到第7天，LPS刺激的hDPSC中CGF组的增殖值明显高于对照组（P <0.05）。此外，在有或没有LPS处理的情况下，CGF组的迁移细胞数在24小时时大于对照组。从第4天到第7天，两组的ALP活性逐渐增加.LPS刺激的CGF显著增强hDPSCs在第21天和第28天矿化结节和牙齿发生相关基因DMP-1和DSPP，成骨相关基因OPN，Runx2和OCN的表达。体内实验显示，在CGF处理组中，X光片，HE和Masson三色染色的结果显示比格犬中未成熟牙齿的持续发育的牙齿（即，软组织向内生长到根管内，增厚的内根 牙本质壁和闭合的顶点），类似于阳性对照组的正常牙齿发育。免疫组织化学染色显示VEGF和Nestin均在再生的纸浆样组织中适度表达，这表明血管化和神经支配。
综上所述，该研究结果表明，CGF对体外暴露于LPS的hDPSCs的增殖，迁移和分化具有积极作用，并且还可以促进体内比格犬中未成熟牙齿的牙本质-牙髓复合体的再生。因此，CGF可能是再生牙髓病学中一种很有前景的替代生物材料。
原始出处：
Xu F, Qiao L, et al., The potential application of concentrated growth factor in pulp regeneration: an in vitro and in vivo study. Stem Cell Res Ther. 2019 May 20;10(1):134. doi: 10.1186/s13287-019-1247-4.
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