J Periodontol：积雪草苷通过wnt途径诱导人牙周膜细胞的成骨分化
2018-03-13 MedSci MedSci原创
积雪草苷是从草药积雪草中提取得到的一种化合物，已证实可促进人牙周膜（hPDL）细胞的成骨分化。本研究调查了积雪草苷诱导的hPDL细胞成骨分化的分子机制。 通过MTT法将hPDL细胞与各种浓度的积雪草苷一起孵育测试细胞活力。通过使用定量实时聚合酶链式反应（PCR）分析mRNA的表达水平。通过碱性磷酸酶活性测定和茜素红染色测定成骨分化。通过免疫荧光和免疫印迹分析β-连环蛋白的亚细胞定位。 结果表明，积
积雪草苷是从草药积雪草中提取得到的一种化合物，已证实可促进人牙周膜（hPDL）细胞的成骨分化。本研究调查了积雪草苷诱导的hPDL细胞成骨分化的分子机制。
通过MTT法将hPDL细胞与各种浓度的积雪草苷一起孵育测试细胞活力。通过使用定量实时聚合酶链式反应（PCR）分析mRNA的表达水平。通过碱性磷酸酶活性测定和茜素红染色测定成骨分化。通过免疫荧光和免疫印迹分析β-连环蛋白的亚细胞定位。
结果表明，积雪草苷在任何测试浓度下对细胞活力没有影响。实时荧光定量PCR结果显示，积雪草苷处理可明显增强Osterix（OSX）和牙本质基质蛋白1（DMP1）mRNA的表达。碱性磷酸酶活性和体外矿化也被明显诱导。有趣的是，积雪草苷剂量依赖性地增加WNT3A mRNA表达，但不增加WNT5A和WNT10B。经免疫荧光染色和蛋白质印迹分析评估，Wnt信号的活化显示导致β-连环蛋白的核积累。用重组人Dickkopf1（rhDKK1）预处理抑制积雪草苷诱导的β-连环蛋白核移位和成骨细胞标记基因表达。此外，rhDKK1减少积雪草苷诱导的DMP1蛋白表达。
综上所述，该研究结果表明，积雪草苷通过激活Wnt/β-连环蛋白信号传导途径诱导hPDL细胞的成骨分化。研究结果表明，积雪草苷可用作牙周组织再生的新型治疗药物。
原始出处：
Fitri AR, Pavasant P, et al., Asiaticoside induces osteogenic differentiation of human periodontal ligament cells through the wnt pathway. J Periodontol. 2018 Feb 22. doi: 10.1002/JPER.17-0471. [Epub ahead of print]
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