Platelets：短期冷冻保存对富含血小板血浆性质和功能的影响
2023-05-18 将军的九分裤 MedSci原创 发表于上海
这项研究表明，通过在-1°C和-3°C下冷冻来保存PRP20个月和80个月可能会影响血小板特性和凝块弹性，以及某些血小板衍生的生长因子水平。
富血小板血浆（PRP）是一种生物疗法，由于其增强的生长因子含量，因其修复作用而广泛用于再生医学领域。虽然它通常在制备后立即新鲜使用，但其冷冻以备将来使用可能是增加其多功能性和新应用的关键。
为了评估冷冻的适用性，在从6名患者收集PRP和血小板裂解物（PL）后，将它们在-1ºC和-3°C的温度下保存20或80个月。 然后测量血小板数量和完整性、生长因子水平、凝块的生物力学特性及其在培养细胞上的生物活性。新鲜PRP和PL用作对照。
图1：冷冻保存后的血小板浓度，大小和活化。根据不同的储存温度（-20/-80ºC）和时间（新鲜，1个月，3个月），PRP和PL中血小板浓度（A），大小（B）和活化（C）的平均值。血小板活化图表示相对于新鲜对照的CD62和CD41阳性细胞。误差线 = 标准偏差。
图2. 血小板生长因子水平。根据活化时间（A / B / C =冷冻前，D / E = 解冻后），储存温度（-20 / –80ºC）和储存时间（新鲜，1个月，3个月）的PRP中血小板生长因子浓度（A / D = PDGF，B / E = TGFB，C / F = VEGF）的平均值。误差线 = 标准偏差。* p < .05;p < .0001。
结果显示血小板大小（p < .01）和凝块弹性（p < .01）增加，PDGF（P < .05）和VEGF（p < .05）水平降低，尽管总体生物活性不受影响，因为培养细胞在细胞活力方面对冷冻和新鲜PRP和PL表现出相同的反应性。
图3. 真皮成纤维细胞的生长曲线。将正常人真皮成纤维细胞用补充有新鲜或冷冻血小板裂解物的培养基一式三份培养，每24小时测量一次细胞活力。A = 冷冻前获得的血小板裂解物;B = 解冻后获得的血小板裂解物。误差线 = 标准偏差。
图4. 冷冻后PRP的纤维蛋白原水平和凝块特性。根据不同储存温度（-20/-80ºC）和时间（新鲜，1个月，3个月）的纤维蛋白原水平（A），杨氏模量（B）和耗散能量（C）的平均值。误差线 = 标准偏差。
这项研究表明，通过在-1°C和-3°C下冷冻来保存PRP20个月和80个月可能会影响血小板特性和凝块弹性，以及某些血小板衍生的生长因子水平。然而，重要的是，其生物活性在体外提高细胞活力方面不受影响。根据这些结果，可以假定通过冷冻保存PRP是进一步使用的可行和适当的选择。
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