Eur Rev Med Pharmacol Sci:骨质疏松症患者中提取的骨髓干细胞衍生的外泌体通过microRNA-21/SMAD7抑制骨生成
2018-11-05 MedSci MedSci原创
为了探索从骨质疏松症患者中提取的骨髓干细胞(MSCs)来源的外泌体是否可以通过microRNA-21/SMAD7抑制骨生成。 分离并培养来自骨质疏松症患者的MSCs。观察MSCs形态,通过流式细胞术鉴定特异性表面抗原。通过茜素红染色和油红染色检测MSCs的成骨能力。通过超速离心从MSCs悬浮液中收集外泌体,并检测MSCs来源的外泌体中的microRNA-21表达。此外,通过qRT-PCR(定
为了探索从骨质疏松症患者中提取的骨髓干细胞(MSCs)来源的外泌体是否可以通过microRNA-21/SMAD7抑制骨生成。
分离并培养来自骨质疏松症患者的MSCs。观察MSCs形态,通过流式细胞术鉴定特异性表面抗原。通过茜素红染色和油红染色检测MSCs的成骨能力。通过超速离心从MSCs悬浮液中收集外泌体,并检测MSCs来源的外泌体中的microRNA-21表达。此外,通过qRT-PCR(定量实时聚合酶链反应)和Western印迹分别检测了用不同来源的MSCs衍生的外泌体处理的MSCs中ALP,Bglap和Runx2的蛋白质和mRNA的水平。通过相关商业试剂盒测试MSCs中的ALP活性。此外,通过Targetscan,miRWalk和miRDB预测microRNA-21和SMAD7的结合位点,并通过荧光素酶报告基因测定进一步验证。此外,研究人员还检测到MSCs来源的外泌体中的SMAD7表达。
从健康成人中提取MSCs,骨质疏松症患者呈贴壁生长状态,表现出细长的形态,可在不同诱导后分化为成骨细胞和成脂细胞。从骨质疏松症患者中提取的MSCs衍生的外泌体中的MicroRNA-21表达明显高于从健康成人中提取的那些。在从骨质疏松症患者中提取的MSCs衍生的外泌体处理后,发现Runx2表达和ALP活性降低。与健康成人相比,SMAD7与微小RNA-21结合并且在骨质疏松症患者中下调。SMAD7的过表达导致ALP,Bglap和Runx2的表达下调。
综上所述,该研究结果表明,MicroRNA-21通过靶向SMAD7调节从骨质疏松症患者中提取的MSCs来源的外泌体来抑制成骨。
原始出处:
Jiang LB, Tian L, Zhang CG. Et al., Bone marrow stem cells-derived exosomes extracted from osteoporosis patients inhibit osteogenesis via microRNA-21/SMAD7. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 2018 Oct;22(19):6221-6229. doi: 10.26355/eurrev_201810_16028.
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