血沉结果出不来,怎么会?让我们来看一看到底是什么原因让全自动血沉仪(意大利ALIFAX厂家的test1)测不出标本的结果呢?
2022年4月26日,一切照常进行血常规的日常工作,在进行血沉检测时,发现有两个标本结果未检测出来,报警NF。查询报警列表,列表对应内容如下表。(因为两者处理和后续分析一致,此处举其中一例进行分享)
信息 |
原因 |
解决方案 |
NF是打印代替ESR值 (即表示结果未检测出) |
血液样本流动不正常,是空气泡沫进入管道/样本针堵塞 |
如果一开始频繁显示此消息,在分析测试前执行冲洗周期程序 |
按照报警提示,查看标本,标本无凝块,标本量足,然后清洗血沉仪器,进行标本再次检测,仍然报警NF;为了防止抽血不畅的情况,电话通知临床重抽标本复查;重抽标本,再次检测,仍然报警NF。经过一系列的操作,基本排除标本不合格的影响,血沉结果依然没有出来。到底是什么原因呢?带着这样的疑惑查看患者其他报告。异常结果如下,其余无异常。
血常规
生化
电泳
电泳图谱
按照上述检验报告,患者贫血明显,免疫球蛋白高,特别是IgG(免疫球蛋白G)升高,基于这样的数据,心里猜想难道是血沉太高,超过我们仪器的线性范围?为了验证我的猜想,标本用魏氏法(国际血液学标准化委员会(ICSH)推荐的参考方法)处理,结果为138mm/h。到这里算是尘埃落地,该标本血沉仪结果不出,真的是因为结果太高了。基于魏氏法的结果,我们给患者出具了仪器法大于线性范围的一个结果。如下:
血沉
该患者结果为什么会这么高,后续跟踪患者,患者抽了骨髓进行检查,查看骨髓图片及报告如下,骨髓诊断该患者为骨髓瘤。通过查阅书籍发现,血沉测定增高影响因素常见于血浆因素(纤维蛋白原,γ球蛋白和异常克隆性免疫球蛋白等增高)、红细胞因素(大红细胞容易形成缗钱状,使血沉加快;各种原因的贫血)、感染因素(某些病毒、细菌、药物等中和了细胞表面的负电荷)。[1]本案例中的患者,不仅贫血,还存在γ球蛋白,完全吻合血沉升高的影响因素。
血片
骨髓片
从ESR(红细胞沉降率)的形成过程分析,ESR的速度受红细胞的下沉力和血浆的阻遏力的相互作用。正常情况下,因红细胞膜表面的唾液酸带有负电荷,红细胞相互排斥使红细胞间的距离约为25nm,彼此分散悬浮于血浆中,下沉受到的阻力较大,故沉降较慢。
红细胞沉降加速的主要原因是红细胞聚集,而影响红细胞聚集的因素,如红细胞之间的排斥力减少而互相聚集呈缗钱状形成,此种聚集的红细胞团块与血浆接触的总面积大为减少,受到下沉时血浆阻遏力也相应减弱,故使红细胞沉降增快。[2]
本案例的患者为骨髓瘤患者,患者血片中的红细胞呈缗钱状排列,红细胞聚集成团,加快了血沉。而且也因为该患者外周血的红细胞呈缗钱状,使得全自动血沉仪的结果不出来,查阅了仪器的操作手册,发现全自动血沉仪的原理是:对毛细管中的红细胞缗钱状结构形成过程进行动态分析,通过20秒内收集1,000个光密度数据,从而得到魏氏法相关的血沉结果。
具体描述为:样本放入仪器后,进行三分钟的60圈/分转速的混匀,然后进样针插入试管吸样,在蠕动泵的动力下经毛细管吸样至检测位。在样本进入到检测位置的20秒内,也就是缗钱状结构的形成过程中,光路检测器将记录1000个有光线透过信号(OD值),经过系统推算,给出ESR结果。换句话来说,自动血沉仪就是检测红细胞缗钱状形成过程的光学变化,但是骨髓瘤的患者,本身红细胞有缗钱状的现象,那么20s内它的红细胞缗钱状的光学信号变化就不明显,导致我们自动血沉仪器检测不出患者的结果。
对于这类仪器法结果不出的标本,在保证了标本合格的情况,需要关注患者其他结果,如果是骨髓瘤患者,如果有条件建议魏氏法处理。但是目前仪器法的血是用的EDTA-K2抗凝剂,而魏氏法是1:4稀释的枸橼酸盐抗凝剂,两种抗凝剂及比例不一致,需要重新抽血吗?
经给查阅文献发现,ICSH建议可以先用EDTA将全血抗凝,然后再用生理盐水(1:4)稀释。[3]但是,WS/T343-2011文件中提到红细胞沉降率测定参考方法的标本的采集要求使用EDTA为抗凝剂,抗凝剂的浓度为3,5umol/mL~5.4umol/mL。当抗凝剂为溶液时,血液的稀释度应<1%。[4]
两者对于使用EDTA为抗凝剂的标本处理方法不一致,具体两者有无区别,本次未进行研究。另外,对应这种骨髓瘤的患者是否可以进行血浆置换,去除血浆因素的干扰而研究红细胞对血沉结果的影响到底有多大,此处仅提出这样的一个构思。当然对于无魏氏法替代处理的医院,并且同本文情况类似的患者,可以出具仪器法结果大于仪器线性范围上限的结果。
【参考文献】
[1]刘成玉.罗春丽.临床检验基础.5版.北京:人民卫生出版社,2012:41.
[2]吕亚莉.血沉在多发性骨髓瘤肾病诊断中的价值[J].现代实用医学,2010,22(03):324-325.
[3]JouJ M,Lewis S M,Briggs C,Lee S-H,De La Salle B,McFadden S. ICSH reviewof the measurement of the erythocyte sedimentation rate.[J].International journal of laboratory hematology,2011,33(2).
[4]卫生部临床检验标准专业委员会."红细胞沉降率测定参考方法."WS/T343-2011.2011-09-30.
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