血HCG结果与临床严重不符，居然不是钩状效应！

01 前 言

人绒毛膜促性腺激素（humanchorionicgonadotropin，HCG）是由滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，其浓度与怀孕的进程密切相关，因此常用来诊断早期妊娠、异位妊娠、先兆流产、产后及人工流产术后的监测^[1]。准确报告HCG检测值尤为重要。

钩状效应即HOOK效应，是指由于抗原抗体比例不合适而导致假阴性的现象，一般发生在一步夹心法中。钩状效应严重干扰标本的正常测定结果，稍有不慎就会对患者的治疗方案产生严重的影响^[2-3]。

02 案例经过

某日夜班早上07：30接到妇科病房医生的电话，被告知急救中心一个年轻女患者怀疑宫外孕破裂，20：30查的HCG做出来阴性，跟临床明显不符，且住院之后手术中探查发现了右侧输卵管间质部妊娠破裂，23：30术后再次抽血的结果是阳性。细询问情况后我找出两次血标本核对信息后原倍重测、稀释复查、早孕试纸条复查和送住院部仪器复查，并调阅出来这例患者的电子病例，一探究竟。

患者女，19岁。因“下腹部疼痛7小时”入院。我院急诊彩超示：右侧附件区非均质性包块请结合血Β-HCG右侧附件区囊性包块腹腔及盆腔积液。查HCG<1.20mIU/mL，诊断：腹痛待查：异位妊娠？卵巢黄体破裂？失血性休克。入院后完善相关检查后行手术探查，术中见右侧输卵管间质部妊娠破裂，术后查血HCG5916.58mIu/mL。

图1 血β-hCG历史记录

03 案例分析

该名患者在就诊24小时内一共进行了3次血β-hCG检查，第一次在急诊查血β-hCG<1.20mIU/mL，在行手术次日，该患者的血β-hCG已经从术后的5916.58下降到3189.93mIU/mL，符合宫外孕术后β-hCG下降的趋势。显而易见，患者第一次的检测结果与临床诊断确实不符。

为了排除是否检验过程中出现的差错导致结果异常，对该名患者前2次标本进行原倍重测，复查的结果与当日标本结果基本一致，到底是什么造成了第一次标本的假阴性？患者为宫外孕，第一次检测结果明显偏低，第二次术后的检测结果却接近6000mIU/mL，或许是因为β-hCG水平过高导致的钩状效应？

于是我尝试使用仪器的稀释模式，将两次的血液标本稀释15倍后进行检测，之后又用早孕试纸条复查和送住院部仪器复查，检测出来的结果依旧与原标本结果一致，难道不是钩状效应导致的假阴性结果？

联系仪器工程师咨询本实验室采用的仪器在其他单位有没有反馈过这样的假阴性结果，工程师表明未出现过此类情况，该仪器在其标注的检测线性范围内结果应可以避免钩状效应，对于超过线性范围的项目可以通过自动稀释计算结果。

排除仪器问题后，想到钩状效应一般发生在一步夹心法中，在化学发光中像二步分析法一般都能避免钩状效应[4]，就是先将样本与捕获抗体进行孵育，洗涤之后再加入标记抗体，继续孵育，最后进行第二次洗涤后检测，这样可以基本消除钩状效应的干扰。遂查阅β-hCG试剂说明书，证实本实验室的β-hCG试剂是采用两步法免疫检测。

综合以上分析，说明导致第一次检测结果假阴性的原因不是钩状效应！跟临床汇报解释了原因后，建议先询问急救中心护士是否采错患者的血。医生反馈说因为较明显的临床症状和超声检查结果，虽然对前面门诊β-hCG结果表示疑惑也并没有影响到患者的入院诊断，已上报不良事件。

04 案例总结

在基于抗原抗体反应这一原理的试验中，要特别注意有没有产生钩状效应这一影响，由于钩状效应发生的不可预见性，及时发现结果的假阴性很重要。在免疫检测中，实验室常采取的措施有稀释法、二步法、金标法等。

但本病例中出现的HCG假阴性并非由免疫反应高剂量钩状效应所致，而是分析前采样环节出错，这也是极少出现的情况。在整个实验误差中，分析前误差约占70%，因此分析前质量保证，对减少实验误差，提高检验质量尤为重要[5]。

参考文献

[1]邱振华，曾再祥，舒云华，等．血清孕酮联合β－人绒毛膜促性腺激素检测在异位妊娠早期诊断及保守治疗中的价值[J]．国际检验医学杂志，2010，31（7）．

[2]王霞，刘金玲.化学发光检测血清人绒毛膜促性腺激素钩状效应1例报道[J].国际检验医学杂志，2013，03：382-383.

[3]陈林坤，沉稳，蔡雷鸣，等.血β-hCG高剂量HOOK效应1例报道及文献复习[J].检验医学与临床，2020，04：575-576.

[4]李永祥，顾光大，李和群. ELISA一步法检测HbsAg的“前带效应”[J].江西医学检验，2004，06：585-581.

[5]吕珏.浅谈医学检验前质量保证[J].临床检验杂志，2007，25（6）：428.