Eur Rev Med Pharmacol Sci：研究发现miR-374b可以通过降解PTEN促进MSCs的成骨分化
2018-06-22 MedSci MedSci原创
本研究旨在探究miR-374b是否通过介导PTEN促进MSCs分化为成骨细胞，从而促进骨折愈合。 提取小鼠间充质干细胞进行实验。流式细胞术确定MSCs表面抗原的表达以鉴定其纯度。使用茜素红染色来检测MSCs是否可以分化为成骨细胞。QRT-PCR检测骨折小鼠模型骨髓MSCs中成骨标志物基因的表达以及miR-374b和PTEN的表达。ALP活性检测试剂盒用于检测细胞中的ALP活性。 Western印迹
本研究旨在探究miR-374b是否通过介导PTEN促进MSCs分化为成骨细胞，从而促进骨折愈合。
提取小鼠间充质干细胞进行实验。流式细胞术确定MSCs表面抗原的表达以鉴定其纯度。使用茜素红染色来检测MSCs是否可以分化为成骨细胞。QRT-PCR检测骨折小鼠模型骨髓MSCs中成骨标志物基因的表达以及miR-374b和PTEN的表达。ALP活性检测试剂盒用于检测细胞中的ALP活性。 Western印迹评估细胞中成骨蛋白的变化。使用生物信息学方法来预测miR-374与靶基因之间的结合位点。使用萤光素酶报告基因测定法来确认miR-374是否可以与靶基因结合。
结果显示，在正常培养下，第4天MSCs长成长梭形。在成骨诱导培养基中诱导7天后，出现钙化结节。MSCs表面抗原标志物检测结果显示CD90为99.12％，CD45为0.23％。茜素红染色显示MSCs具有分化成成骨的能力。MiR-374b和PTEN的表达水平在小鼠骨折早期明显增加，但在后期没有观察到明显差异。过表达miR-374b后，细胞ALP活性、成骨相关基因和成骨相关蛋白的表达显著增加，而敲除miR-374b后，观察到相反的结果。萤光素酶报告测定的结果显示miR-374b可结合PTEN。如上所述，miR-374b的过表达可显著增加成骨相关基因和蛋白质的表达，而PTEN和miR-374b的过度表达可部分逆转结果。
综上所述，该研究结果表明，miR-374b可以通过降解PTEN促进MSCs的成骨分化，从而促进骨折愈合。
原始出处：
Ge JB, Lin JT, et al., MiR-374b promotes osteogenic differentiation of MSCs by degrading PTEN and promoting fracture healing. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 2018 Jun;22(11):3303-3310. doi: 10.26355/eurrev_201806_15149.
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