诺如病毒标本采集及实验室检测方法

标本类型：

诺如病毒的检查方法，一般不需要抽血化验，通常是通过便常规、呕吐物等这些标本进行检测。

主要的检测方法有以下几种：

第一种，首选的粪便标本，沾取粪便5克（黄豆大小）以上置于清洁、无菌、干燥的密闭容器内等待检测。

第二种，肛拭子，这些适合于患者考虑是诺如病毒感染而没有粪便的，或者说排不出粪便的，就需要借助于肛拭子采取粪便。肛拭子的检出率是低于粪便标本的，并且比较容易出现假阴性，因此在临床中使用了几率相对较少，尽量是让患者自行留取粪便进行送检。

第三种，呕吐物，采集呕吐物5克以上，置于清洁、无菌、干燥的密闭容器内等待送检。

第四种，水，如果怀疑诺如病毒是水源性污染爆发的时候，可以采集1升以上的水样进行检测。

第五种，食品，但是因为食品成分比较复杂，病毒含量也比较低，所以比较难以提取诺如病毒，在临床当中应用的比较少。

还有一种是环境涂抹采样，像厨房、厕所、门把手、玩具等，用无菌拭子涂抹表面之后，挤入到缓冲液当中去送检，这些标本都可以检测出来诺如病毒。

✍️标本采集要求：

发病3天内的粪便，带便肛拭子或者呕吐物标本，粪便标本应在发病首日采集，至多不能超过发病急性期(48～72h)，此时为稀、软便，病毒排出量最多。肛拭子用采样棉签蘸生理盐水或病毒保存液、或PBS液后，插入肛门4-5cm(幼儿2-3cm)处，轻轻旋转擦取直肠表面带便粘液，置于含病毒保存液的采样管中，病人呕吐物是粪便标本的最佳补充，有助于病原的诊断。该标本的采集、储存和运送条件同于粪便。从流行病学角度出发，在水、食物或其它外环境标本中检出诺如意义重要。需注意检测技术要锁定在高度怀疑的传播媒介上，尽早采样并置4℃存放，若是饮用水，需用大容量(5～100L)浓集病毒后检测。

粪便：首选样本类型。若为水样便，采集1-5mL；若为成形便，采集 5g左右，将样本置于清洁、无菌、干燥的密闭容器内严格密封送检。

肛拭子或呕吐物标本：采集后放在含有无菌PBS缓冲液或Hank’s液的采样管中，尽快送检。

✍️实验室检测方法：

目前常用的实验室检测方法为胶体金法和分子生物学方法。

（1）胶体金法

可检测人粪便中诺如病毒的GI和GII型抗原的定性检测。此方法操作简便、灵敏度较高，只需5-15分钟，就可快速检测出是否感染了诺如病毒。

（2）分子生物学方法

逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）能检测出低浓度GI、GII和GIV三个致病型的诺如病毒感染，该方法灵敏度高，特异性强。