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PLOS MED:新型超灵敏疟原虫检测方法

2015-03-10 赵洲译 MedSci原创

对控制疟疾的流行制定计划、设定目标和评价的关键因素是对疟原虫进行精确而灵敏的检测。很大一部分的无症状的寄生虫感染仅能通过分子手段的监测被识别。而这些感染可以继续传播给蚊子。由于在一个DNA样本中含有丰富的靶点序列,使用PCR进行分子检测的灵敏度就因而受到了限制。因此,在低密度感染的患者中,检测效果就变得不太理想。研究人员以多复制基因组序列为靶点,对低密度感染进行可靠的检测可以增加PCR检测的灵

对控制疟疾的流行制定计划、设定目标和评价的关键因素是对疟原虫进行精确而灵敏的检测。很大一部分的无症状的寄生虫感染仅能通过分子手段的监测被识别。而这些感染可以继续传播给蚊子。由于在一个DNA样本中含有丰富的靶点序列,使用PCR进行分子检测的灵敏度就因而受到了限制。因此,在低密度感染的患者中,检测效果就变得不太理想。研究人员以多复制基因组序列为靶点,对低密度感染进行可靠的检测可以增加PCR检测的灵敏度,并且研究这些PCR检测的社群流行性数据的影响。

研究人员采用了两种定量的PCR检测。以与高复制的端粒相关的重复性元件2TARE-2)和var酸性终端序列(varATS)为靶点。采用这种方法进行检测的限度为每微升0.03-0.15个寄生虫,是标准的18S rRNA定量PCR检测灵敏度的十倍。在坦桑尼亚进行的一次代表性研究中,295/498样本被超灵敏检测出阳性。光学显微镜错失了169个感染病例(57%)。18S rRNA定量PCR错误地识别了48例(16%)。TARE-2varATS定量PCR技术改善了疾病流行率的估测,但当寄生虫很少量存在于抽取的血液容量时,感染仍可能无法检测出来。

疟疾在人群中的流行主要依靠所使用的检测工具的灵敏度。获得精确的疟疾流行数据对监控干预是否成功有着重要的意义。更灵敏的检测手段表明现在疾病的流行程度远比想象中要更加严重。

原始出处:

Hofmann N, Mwingira F, Shekalaghe S,Robinson LJ, Mueller I, Felger I (2015) Ultra-Sensitive Detection of Plasmodium falciparum byAmplification of Multi-Copy Subtelomeric Targets.PLoS Med 12(3): e1001788. doi:10.1371/journal.pmed.1001788

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