Stem Cell Res Ther:miR-508-5p通过靶向糖蛋白非转移性黑素瘤蛋白B对人牙髓干细胞牙源性分化的抑制作用
2019-01-25 MedSci MedSci原创
尽管已经鉴定了糖蛋白非转移性黑素瘤蛋白B(GPNMB)参与调节人牙髓干细胞(hDPC)的牙源性分化,但其潜在的机制尚未完全明了。本研究旨在探究miR-508-5p对GPDMB表达和hDPCs牙源性分化的影响。在该研究中,通过流式细胞术分析分离并鉴定hDPCs。基于生物信息学分析,进行双荧光素酶报告基因测定以验证GPNMB充当miR-508-5p的靶标。通过其抑制或过表达(miRNA模拟物和miRN
尽管已经鉴定了糖蛋白非转移性黑素瘤蛋白B(GPNMB)参与调节人牙髓干细胞(hDPC)的牙源性分化,但其潜在的机制尚未完全明了。本研究旨在探究miR-508-5p对GPDMB表达和hDPCs牙源性分化的影响。
在该研究中,通过流式细胞术分析分离并鉴定hDPCs。基于生物信息学分析,进行双荧光素酶报告基因测定以验证GPNMB充当miR-508-5p的靶标。通过其抑制或过表达(miRNA模拟物和miRNA抑制剂)研究了miR-508-5p在hDPCs的成牙分化中的调节作用。qRT-PCR和Western印迹分析用于检测牙本质标记基因和蛋白质的表达。进行碱性磷酸酶(ALP)活性和茜素红S染色的测定以评估牙源性表型。
结果首次发现hDPCs在牙齿发育过程中miR-508-5p表达水平逐渐下降,而GPNMB的表达明显上调。miR-508-5p对GPNMB的抑制作用通过hDPCs中的寡核苷酸转染和293T细胞中的双荧光素酶报道分子测定来确定。随后,观察到miR-508-5p过表达后hDPCs牙齿发生的明显抑制,这与几种成牙本质细胞特异性基因(如牙本质基质蛋白1(DMP-1),牙本质涎磷蛋白( DSPP)和骨钙素(OCN))的表达水平降低一致,以及ALP活性降低和茜素红S染色减弱一致。此外,GPNMB(缺乏3'-UTR)的异位表达挽救了miR-508-5p对牙源性分化的影响。
该研究表明,miR-508-5p通过靶向GPNMB调节hDPCs的成骨,并提供了对microRNA在hDPC分化中的关键作用的新见解。
原始出处:
Liu F, Wang X, et al., The suppressive effects of miR-508-5p on the odontogenic differentiation of human dental pulp stem cells by targeting glycoprotein non-metastatic melanomal protein B. Stem Cell Res Ther. 2019 Jan 22;10(1):35. doi: 10.1186/s13287-019-1146-8.
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