Biotechnol Rep:重组人牙本质基质蛋白1可诱导人牙周膜细胞的成骨分化
2019-06-15 不详 网络
本研究旨在制备重组人牙本质基质蛋白1(DMP1)并测试在大肠杆菌中产生的重组DMP1是否具有功能活性。使用pET22b质粒产生包含编码DMP1蛋白的基因的基因构建,所述基因在其C末端具有多组氨酸序列,并在大肠杆菌中表达。培养条件的优化使得能够在37℃下用0.5mM异丙基β-D-1-硫代半乳糖吡喃糖苷(IPTG)和DMP1重组蛋白质诱导基因表达6小时。使用Ni亲和层析纯化重组蛋白。检测DMP1对人牙
本研究旨在制备重组人牙本质基质蛋白1(DMP1)并测试在大肠杆菌中产生的重组DMP1是否具有功能活性。
使用pET22b质粒产生包含编码DMP1蛋白的基因的基因构建,所述基因在其C末端具有多组氨酸序列,并在大肠杆菌中表达。培养条件的优化使得能够在37℃下用0.5mM异丙基β-D-1-硫代半乳糖吡喃糖苷(IPTG)和DMP1重组蛋白质诱导基因表达6小时。使用Ni亲和层析纯化重组蛋白。检测DMP1对人牙周膜(PDL)细胞的活力,成骨分化和钙化的影响。纯化的DMP1可诱导PDL细胞中成骨相关基因的表达和钙沉积。
这些发现表明,在大肠杆菌中产生的DMP1可以诱导人PDL细胞的成骨分化,从而改善牙齿修复和再生。
原始出处:
Ahmad AR, Kaewpungsup P, et al., Recombinant human dentin matrix protein 1 (DMP1) induces the osteogenic differentiation of human periodontal ligament cells. Biotechnol Rep (Amst). 2019 May 23;23:e00348. doi: 10.1016/j.btre.2019.e00348. eCollection 2019 Sep.
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