CLIN CHEM:血清制备过程产生的小分子会影响心肌梗死的诊断?
2017-06-01 MedSci MedSci原创
心肌肌钙蛋白T(cTnT)是目前已知急性心肌梗死(AMI)的公认生物标志,但是它在血清中易于被蛋白水解降解。这种降解通常归因于μ钙蛋白酶的作用,尽管也可能有其它原因。近日,临床化学杂志(Clinical Chemistry)在线发表了一项采用免疫印迹和质谱(MS)分析方法研究 cTnT降解的研究。在本研究中,研究人员探讨了血清样品制备的过程中凝血酶介导的cTnT切割发生的假说。
心肌肌钙蛋白T(cTnT)是目前已知急性心肌梗死(AMI)的公认生物标志,但是它在血清中易于被蛋白水解降解。这种降解通常归因于μ钙蛋白酶的作用,尽管也可能有其它原因。近日,临床化学杂志(Clinical Chemistry)在线发表了一项采用免疫印迹和质谱(MS)分析方法研究 cTnT降解的研究。在本研究中,研究人员探讨了血清样品制备的过程中凝血酶介导的cTnT切割发生的假说。
从AMI肝素血浆和血清样品中分离的cTnT的比较显示,血浆样品中的cTnT主要作为全长分子(约35kDa)存在,而在血清样品中,其仅仅以29kDa的片段存在。重组cTnT或天然三元心肌肌钙蛋白复合物与凝血酶或正常人血清(NHS)孵育导致形成与AMI血清样品中检测到的29kDa产物相似的29-kDa的产物。当凝血酶或NHS用水蛭素(凝血酶的特异性抑制剂)提前处理,或在正常肝素血浆中培养肌钙蛋白时,没有观察到cTnT发生降解。当通过MS分析凝血酶介导的cTnT蛋白水解产物时,鉴定出由氨基酸残基(aar)2-68和69-288组成的2个片段,这表明凝血酶在R68和S69之间的切割cTnT。
研究结果表明,AMI血清样品中cTnT的29kDa片段主要是由血清样品制备过程中凝血酶裂解所产生的。
原始出处:
Ivan A. Katrukha, Alexander E. Kogan,
Alexandra V. et al. Thrombin-Mediated Degradation of Human Cardiac Troponin
T.Clinical Chemistry Jun 2017, 63 (6) 1094-1100; DOI:
10.1373/clinchem.2016.266635
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