分享 | 高温灭菌操作中常见错误的分析

高压蒸汽灭菌锅是微生物实验中必不可少的设备，在操作过程中常常会遇到灭菌失败的情况，或是灭菌锅内样品不能全部有效灭菌，应该怎么办呢？

今天我们来介绍一下高压蒸汽灭菌锅在使用过程中的几点注意事项，希望能够给大家带来帮助！

01 热传递时间延迟

对于高压蒸汽灭菌锅来说，装载的物品数量越多，到达121℃的时间也越长，灭菌时间不够，导致灭菌不良。即热量传递会有时间延迟，高压蒸汽灭菌锅显示的温度为高压蒸汽灭菌锅腔体内温度，但锅内装载物品的达到设定温度要有一段时间的延迟，这样即会导致灭菌样品的有效灭菌时间不够。

因此，建议高压蒸汽灭菌锅内装载物品最多不超过锅容积的75%，如果装载量大的话要适当加长灭菌时间，大量液体灭菌时也需加大灭菌时间。

02 灭菌物品大小适宜、布局合理

为了达到灭菌的目的，锅内待灭菌物品应不要太紧太满，以利于蒸汽流通。体积过大蒸汽就不易穿透物品。最下层物品摆放尽量稀疏，因下层蒸汽量相对少，分压不够，往往造成灭菌不完全。因此摆放时注意上下交错叠放，使留有较多空隙，利于蒸汽穿透。如需要对较小物品灭菌时，应事先装在容器中，所选容器也应尽量小且浅，且有通气孔，若用过大、过深及不带孔的容器，蒸汽不易穿透。同时灭菌物品应尽量垂直放不要平放，切勿挤压。

03 灭必须充分排除冷空气

压力蒸汽灭菌锅内蒸汽的温度不仅与压力有关，而且与蒸汽的饱和度有关。灭菌锅内冷空气未排尽时，即使蒸汽压力达到要求，温度也上不到相应的高度，而且还影响高压蒸汽穿透被灭菌物品的能力。

如使用灭菌袋时，不要封口，在袋内装入100ml左右的水，以免袋内有空气残留；袋盖的密封性容器灭菌时打开盖子，或拧松盖后再灭菌。

04 灭菌物卸载及检查

1、取出灭菌物，检查包装完整性；

2、指示带或化学指示卡是否能达到灭菌要求；

3、取出的灭菌物掉在地上、放错地方、沾水的，湿包视为受污染；

4、登记灭菌器使用记录表。

05 灭菌物登记

1、无菌物品应该和非无菌物品区分开来，分别放置，避免混淆；

2、各种消毒标记明确、完整、必须有名称、有效日期、责任人、核对者；标记不清、记录不全，均不得发放；

3、经高压灭菌后，无菌物品在传递过程中应保持清洁、干燥、无污染，消毒室车子（分为灭菌物品车、清洁物品车）每天用消毒液擦拭，并有标志。

06 无菌物品的存储

1、无菌室通风干燥，应向外排风。

2、按要求进行无菌室内环境、柜子、存放架的清洁及消毒；

3、进入无菌室应由相对固定专职人员，入室前要洗手、戴口罩、换鞋，严格无菌操作规程，其他人员不得入内；

4、无菌物品摆放：

A.与天花板的距离≥50cm，便于空气流通，远离出风口及消防喷头；

B.与地面距离≥20cm，降低灰尘污染，易于清洁；

C.与墙距离≥5cm，避免靠近墙体滋生细菌；

5、无菌物品应分类放置，严格定位、标记清楚，按灭菌日期先后顺序使用；

6、每日巡检无菌包的灭菌日期及保存情况，过期或者受潮要重新包装灭菌。

08 无无菌物品发放

1、核对物品名称与实物是否相符；

2、标签有效期是否与实物包装材料相符；

3、双人核对后发放；

4、无菌物品一旦发出，严禁原路径返回。