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Clin Oral Investig:氯剂对口腔病原菌的抑菌效果

2023-08-26 医路坦克 MedSci原创 发表于上海

本文比较不同抗菌药物对口腔病原菌的抗菌效果。

口腔生物膜由大量口腔微生物组成,与龋齿、牙周炎等口腔疾病有关。一个庞大的细菌群落与复杂牙菌斑的发生和功能密切相关,进一步导致患者层面的组织破坏,并导致口腔感染。在龋齿中,许多产酸细菌本质上是革兰氏阳性的,包括变形链球菌、炎链球菌和naeslundii放线菌,而与牙周相关的物种,如金黄色葡萄球菌、中间普雷沃氏菌、黑化普雷沃氏菌和核梭杆菌,更常见的是兼性厌氧菌,属于革兰氏阴性菌门。总的来说,微生物组是诱发疾病的前提;然而,由于变形链球菌具有淀粉样蛋白形成能力,它仍然是牙齿生物膜粘附和停留的主要贡献者。随着时间的推移,人们采用了不同的预防策略来减少微生物的数量,从而降低疾病的风险。人们的兴趣主要集中在机械清除菌斑上,但也引入了各种抗菌剂

氯己定是一种已被证明具有杀菌特性的化合物,它的工作原理是破坏细菌细胞的外层,导致通过内层的被动扩散,随后膜电位崩溃和细胞裂解。有研究报道革兰氏阳性球菌对氯己定特别敏感。然而,该反应的速率取决于其发生的环境的pH值。针对牙周病,氯己定(CHX)是口腔杀菌剂中的黄金标准,因此被频繁使用。然而,CHX对龋齿的影响尚不确定。此外,局部副作用也有报道,特别是使用CHX,包括牙齿和舌头变色以及味觉障碍。

过氧化物、牛磺酸、三氯生、精油和聚维酮碘等制剂被推荐作为CHX溶液的替代品,因为它们能够穿透生物膜团块,产生抑菌或杀菌作用。氧化剂,如过氧化氢(H2O2),由于其广谱抗菌活性,通常用于临床环境。H2O2对革兰氏阴性菌有效,被认为对环境和组织友好,因为它能迅速分解成水和氧。Dakin牙科溶液的主要成分是次氯酸钠(NaOCl),由于其作为氧化剂的作用,它具有众所周知的抗菌特性。确切的作用机制尚不完全清楚,但据信这些试剂从底物转移电子,导致底物氧化并同时还原试剂,这一过程破坏和/或分裂了蛋白质、碳水化合物和脂类中的化学键。在碱性条件下,氯的主要形式是次氯酸盐(OCl-),与其他形式相比,次氯酸盐反应更快,对细菌孢子的作用更强。因此,在根管工作中通常使用它。除了NaOCl广泛的抗菌特性外,它不会染色组织并且易于使用。

添加氨基酸的次氯酸钠产品于20世纪末推出,用于化学机械除龋(Carisolv®)和清洁牙周袋(Perisolv®)。这些产品具有抗菌能力,其等级与Dakin溶液或稳定次氯酸相当。除已知具有抗菌作用的其他卤素——氟(F-)、溴(Br)和碘(I-)——水溶液外,氯(Cl-)与生物酶反应更相容,因此副作用最小。相对不活跃的过氧化氢与生物分子反应缓慢,相反,氧化氯溶液(NaOCl)寿命短,容易转化为对组织友好的盐产品。

本研究旨在比较目前可用的氯溶液,特别是含氯胺溶液与其他已知的抗菌物质对不同口腔病原体的疗效。零假设指出,氯胺没有潜力作为一种抗菌剂对抗与龋齿和牙周炎有关的细菌。

研究设计及方法流程图

材料与方法采用不同的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)技术,将几种次氯酸钠溶液(NaOCl)——perisolv®、Carisolv®和Dakins溶液——与氯己定(CHX)和过氧化氢H2O2)等效,对10种与龋齿和牙周炎相关的口腔微生物进行抑菌。调节药剂活性氯分子最终浓度为70 mmol/L。

结果H2O2和Perisolv®氨基酸外,其余药剂均有抑菌作用。琼脂扩散试验结果显示CHX对所有10个标本的效果最好(p < 0.05),其次是Perisolv®的NaOCl和Dakins溶液。相应的,在琼脂微稀释的肉汤中,与2.2 mmol/L的Dakin溶液相比,0.03 mmol/L的CHX对微生物的根除效果最好。Dakin溶液在0.2 mmol/L时杀菌效果最好(p < 0.001),其次为Perisolv®(2.14 mmol/L)、CHX (2.38 mmol/L)和Carisolv®(3.33 mmol/L)。在活/死分析中,暴露于2倍浓度的药物60分钟后,CHX (35 mmol/L)对2对数聚集杆菌放线菌产生抑制作用,而变形链球菌在10分钟后对CHX和Dakin的影响分别为0.8和8.8 mmol/L。

每种药剂对每种菌株的MBC值

每组细菌(龋齿和牙周)杀灭5株细菌所需70 mmol制剂的体积(μL, MV, SD)

琼脂平板上的肉汤微量稀释一式两份。左起不同浓度的试验剂对变形链球菌IB(上两行)和变形链球菌OMZ65(下两行)在唾液杆菌素琼脂上的生长抑制作用:A板:70、35、17.5、8.8、4.4、2.2 mmol L-1;B板:1.1、0.5、0.3、0.14、0.07、0.03 mmol L-1。无菌落滴液(或空琼脂表面)等于MBC值,表明试验溶液细菌减少≥99%。积极和消极控制的效果与预期一样,没有显示出来

所有被测试的冲洗剂和每组一种细菌的时间杀伤曲线;AA(牙周)SM-IB(龋齿)。绘制了12倍稀释度,并在开始时间点添加抗菌药物并监测至1小时

 

结论次氯酸盐替代CHX具有明显的抗菌潜力,并能促进快速抗菌效果。

文献来源:Almhöjd US,  Lehrkinder A,  Roos-Jansåker AM,Antimicrobial efficacy of chlorine agents against selected oral pathogens.Clin Oral Investig 2023 Aug 22;

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