J Ethnopharmacol：茵陈四逆汤治疗ANIT诱导胆汁淤积性肝损伤的潜在有效成分和作用机制

背景：茵陈四逆汤（YCSND）是临床上用于治疗胆汁淤积性肝损伤(CLI)等肝脏疾病的经典中药方剂。然而，YCSND的物质基础和潜在机制尚不清楚。

目的：采用血清药物化学、代谢组学、网络药理学等方法，探讨YCSND治疗CLI的有效成分及作用机制。

方法：采用生化指标、肝脏指数、组织病理学分析评价YCSND对ANIT诱导的CLI大鼠的保护作用。然后，采用UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS/MS分析了YCSND血清和肝脏中的迁移成分，包括原型成分和代谢成分。此外，利用血清和肝脏代谢组学对内源性代谢物进行了研究，以发现潜在的生物标志物、代谢途径和相关机制。

此外，以体内迁移成分为导向的网络药理学也被用于确定YCSND的有效成分、核心靶点和信号通路。最后，通过分子对接和分子动力学模拟(MDS)预测组分与核心靶基因的结合能力，并通过实时荧光定量pcr (RT-qPCR)实验检测核心靶基因mRNA表达量。

结果：药效学研究表明，YCSND对CLI大鼠具有明显的肝保护作用。通过血清药物化学分析，共分离得到68个化合物，包括32个原型成分和36个代谢成分。结合分子对接和MDS的网络药理学结果显示，芹菜素、柚皮素、18β-甘草次酸和异长柄花素对6个核心靶点(EGFR、AKT1、IL6、MMP9、CASP3、PPARG)具有较好的结合能力。此外，采用RT-qPCR验证肝组织中PI3K、TNF-α、MAPK3和6个核心靶基因。

代谢组学揭示了YCSND通过调节原胆酸和生物合成、苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸的生物合成、牛磺酸和次牛磺酸代谢、花生四烯酸代谢等4条代谢途径抗CLI的作用。结合代谢组学和网络药理学鉴定了与CLI相关的4条通路，包括PI3K-Akt、HIF-1、MAPK和TNF信号通路，揭示了YCSND抗CLI的多种机制，可能涉及抗炎和细胞凋亡。

结论：基于血清药物化学、网络药理学和代谢组学的研究表明，YCSND对CLI大鼠具有多组分、多靶点、多通路的保肝作用，为阐明中药方剂的物质基础和作用机制提供了有力手段。

原始出处：

Liu Y, Chen H, Yang G, Feng F. Metabolomics and serum pharmacochemistry combined with network pharmacology uncover the potential effective ingredients and mechanisms of Yin-Chen-Si-Ni Decoction treating ANIT-induced cholestatic liver injury. J Ethnopharmacol. Published online August 18, 2024. doi:10.1016/j.jep.2024.118713