Asian Journal of Psychiatry：舒肝解郁胶囊通过靶向海马 GABA(A) 受体 δ 亚基的四氢孕酮代谢途径缓解经前抑郁症

经前期综合征（PMS）及其严重形式--经前期情感障碍（PMDD）--是一种常见疾病，以周期性情感异常和不适的身体症状为特征，严重影响患者的日常生活、工作和社会交往。目前，PMDD 已被列入《精神疾病诊断与统计手册》第五版（DSM-5），作为抑郁障碍下的一个独立实体，患病率为 3%-17%。经前期抑郁症是这些表现中最突出的症状，它造成持续的悲伤感和兴趣丧失。不仅如此，新出现的证据还支持一种假设，即PMDD的病理生理学涉及GABAA-R对整个月经周期动态ALLO波动的反应受损，表现为情感症状和生理应激反应调节不良。 相关研究还表明，海马GABAAR亚基中的α4和δ表达增加，表明ALLO介导了部分GABAAR亚基的异常表达，这与烦躁和抑郁情绪有关。

舒郁胶囊是一种市售的中药处方，临床实验证明可缓解经前期综合征/PMDD抑郁症状，可调节大鼠模型中5-HT3AR和5-HT3BR的异常表达以及5-HT3通道电流的改变。此外，舒郁胶囊治疗经前期综合征的疗效可能涉及调节MOR受体信号转导，通过逆转应激大鼠体内p-ERK、p-CREB和BDNF的紊乱来缓解抑郁样行为或增加海马神经元中 5-HT1AR 蛋白水平并激活 5-HT1AR 介导的 cAMP-PKA-CREB 信号通路。然而，舒郁胶囊的其他药理机制尚不清楚。本研究基于FST建立了可靠的经前抑郁大鼠模型，阐明了舒郁胶囊的抗抑郁作用及其内在机制，并以GABAAR为重点解释了ALLO的假说及其代谢通路机制。

这项研究通过强迫游泳试验（FST）建立了经前抑郁症雌性Wistar大鼠模型。通过行为试验、酶联免疫吸附试验（ELISA）、GABAARδ干扰敲除腺病毒和过表达载体腺病毒、RT-qPCR、Western-Blot和免疫组化检测表达等方法确定治疗靶点。

Fig. 1. Establishment of rat models of FST-based Premenstrual Depression and Shuyu capsule intervention.

大鼠发情周期是指大鼠生殖系统和内分泌系统在组织学和生理学上的周期性变化。在这篇研究中，大鼠卵巢切除后可通过激素诱导正常的发情周期根据 Hoi-Por Ho 等人报告的方法。记录 14 天的数据并绘制线图（见Figure1-B）以确定大鼠的发情周期。如果发情周期不规则的大鼠每个时期阴道表皮细胞的电阻值不规则，则淘汰这些大鼠。如果发情周期有规律的大鼠的电阻值在 4 天或 5 天的周期内表现出一定的规律，且最大值超过 3 千欧，则保留这些大鼠进行接下来的实验。

利用 FST 建立大鼠经前抑郁模型，并评估抑郁样行为。模型判断和分组方面，D1 阶段和 P/E 阶段大鼠的不动持续时间从高到低的差异。根据所需实验数量，将前 30%的大鼠随机分为模型组（共 36 只），后 30%的大鼠分为对照组（共 12 只）。药物干预方面，实验分为四组（每组 n=12）： 对照组、模型组、氟西汀组、舒郁胶囊组。氟西汀组大鼠从第 24 天至第 36 天服用氟西汀。

行为试验采用随机顺序的设计原则，保证每组动物数量不变。药物治疗后第9天(D1)、第11天(P/E)分别进行EPM、TFT、FST检测。

Fig. 3. Flow Chart of Model Rat Virus Intervention Experiment and Its Brain GABAAR δ expression.

合成 GABA-ARδ 亚基干扰 R_ Gabrd 基因 AAV9 过表达病毒和 R_Gabrd 干扰腺相关病毒，并将其注射到大鼠体内。药物干预后，收集 NR 期和 R 期大鼠的行为指标。随后采集大鼠的全血和海马，在-80°C下保存至检测酶联免疫吸附试验（ELISA）。随后进行实时 PCR、Western 印迹和免疫组化。

实验结果采用 GraphPad Prism 9.00 进行统计分析，对 FST、EPM、TFT 等行为指标采用双因素方差分析法进行分析。结果以 Mean±SEM 表示（均值±均值标准误差），部分行为指标采用单尾 t 检验。P 值小于 0.05 为具有统计学意义。

Fig. 2. Variations in ALLO level and metabolic pathway in the peripheral and central nervous system of rat models. 

Fig. 4. GABAAR δ Subunit expression and behavioral changes in two groups of rats after virus injection.

基于FST的大鼠模型表明，舒郁胶囊可缓解典型的经前抑郁，并可调节5α-还原酶和3α-类固醇脱氢酶的交替，增强孕酮到异孕酮的代谢途径，以及靶向GABAARδ亚基，从而缓解PMDD大鼠模型的经前抑郁。

Fig. 5. GABAARδ Expression in the hippocampus and drug intervention behavioral changes of model rats after virus injection.

总的来说，经前抑郁是由5α-还原酶和3α-类固醇脱氢酶的表达降低引起的，从而导致孕酮、5α-二氢皮质酮和异孕酮的变化。海马区GABAARδ亚基功能的异常变化参与了潜在的发病机制。然而，舒愈胶囊对经前抑郁的作用是由allo介导的海马ABAARδ亚基介导的。

原始出处：

Zhang H, Qiao M, Gao D, Wang J, Sun C, Sun Y, et al. Shuyu Capsule Alleviates Premenstrual Depression via Allopregnanolone Metabolic Pathway Targeting GABA(A) Receptors δ Subunit in the Hippocampus. Asian Journal of Psychiatry. 2023;103800.