肿瘤耐药怎么破？恒定自然杀伤T（iNKT）细胞解决胃癌患者耐药问题，刺激T细胞扩增24倍，抑制肿瘤发展！

1、iNKT细胞疗法克服了免疫治疗耐药问题，患者在治疗期间无严重免疫不良反应发生。

2、iNKT细胞疗法使得患者体内少数预先存在的T细胞克隆从初始的2%扩增到48%，足足增加了24倍。患者淋巴细胞免疫浸润、激活和TH-1极化相关基因表达均大幅度增加。

3、在接受iNKT细胞疗法1个月后，令人惊喜的是，结果显示胃壁增厚稳定，网膜结节间隔缩小；3个月、6个月和9个月（分别为6个周期、12个周期和18个周期）的CT扫描显示，网膜结节进一步缩小。

基线、3个月、6个月和 9个月时网膜肿瘤结节（黄色箭头）

胃癌是全球第五大恶性肿瘤，但仅有36％的转移性疾病患者能够存活5年以上。靶向程序性细胞死亡蛋白1（programmed cell death protein 1，PD-1）和程序性死亡配体1（programmed cell death 1 ligand 1，PD-L1）的免疫检查点抑制剂（immune checkpoint inhibitors，ICIs）出现，为胃癌的临床治疗提供了新的策略，但只有10-30%的患者能够在ICI的治疗中获益，尤其抗肿瘤免疫力低下或缺乏抗肿瘤免疫力的癌症患者对ICI的治疗反应欠佳。因此，需要寻找新的免疫治疗方法来克服这一问题。

恒定自然杀伤T（invariant natural killer T，iNKT）细胞在胸腺中发育，聚集在肝脏中，其次分布在脾、骨髓、淋巴结、皮肤粘膜和外周血等其他部位。在外周血中，iNKT细胞约占循环T细胞0.01-0.1%。尽管iNKT细胞数量稀少、来源有限，但由于其共同表达T细胞和NK细胞的典型表面受体，因而发挥着多种抗肿瘤效应。

近期，一项题为Overcoming resistance to programmed cell death protein 1(PD-1) blockade with allogeneic invariant natural killer T-cells (iNKT)的临床研究发现，iNKT细胞可以作为一种新疗法来克服胃癌免疫治疗的耐药问题，iNKT细胞疗法促使患者体内T细胞扩增24倍，同时激活淋巴细胞免疫浸润和激活，抑制肿瘤发展。这项研究为开发新的胃癌免疫疗法提供了新思路，有望在未来为胃癌患者提供更好的治疗选择。

此研究对象为一名73岁男性患者。在常规随访中，该患者被发现患有缺铁性贫血，内窥镜检查显示胃小弯处有一个巨大、溃疡性、非环状肿块；活检显示为中度分化、HER-2阴性腺癌（HER-2为胃癌主要靶点，在胃癌细胞扩增的比例约为 4%～44%）；胸部/腹部/盆腔计算机断层扫描（CT）显示，胃底肿块为异质、溃疡和部分坏死，与内窥镜检查时发现的肿块一致，并伴有腹膜癌肿。最终，该患者被确诊为微卫星高度不稳定（MSI-H）晚期胃腺癌。

注：微卫星是短DNA序列的串联重复序列，在肿瘤的基因组中，微卫星存在小的基因突变，导致其不稳定，称为微卫星不稳定性（MSI）。MSI共分为高度不稳定（MSI-H）、低度不稳定（MSI-L）和稳定（MS-S）。

于是，医生对该患者设计了一系列的治疗方案。首先，患者接受了4个周期的Pembrolizumab（一种抗PD-1单克隆抗体）治疗，不巧的是，治疗后CT 扫描显示其腹膜结节增大，内镜检查（胃肠造影）显示之前已发现的胃肿块进展和增大，并伴有出血。鉴于此，患者方案改为Nivolumab（一种阻断PD-1和其配体相互作用的单克隆抗体）联合亚叶酸、5-氟尿嘧啶和奥沙利铂（FOLFOX）治疗，然而22个疗程（17个月）后，CT 扫描显示近端胃壁增厚情况恶化，邻近的网膜结节也有所进展，肿大结节的活检证实为中度分化腺癌。

由此看来，传统的药物治疗已经无法将癌症“扼杀”，难道说该患者真的无药可医了吗？就在众人焦头烂额之际，转机悄然而至……

一项针对iNKT细胞异体移植的临床试验正在紧锣密鼓的开展。这项研究的目的是为了探究来自健康捐赠者的异体iNKT细胞是否能够克服癌症患者的免疫治疗耐药问题。

该患者随即接受了一次 iNKT细胞输注（剂量为4.3 ×106个细胞/千克），并继续接受 Nivolumab维持治疗（剂量200 毫克，每14 天一次）。1个月后对其进行CT 扫描，令人惊喜的是，结果显示胃壁增厚稳定，网膜结节间隔缩小；3个月、6个月和9个月（分别为6个周期、12个周期和18个周期）的CT扫描显示，网膜结节进一步缩小。

基线、3个月、6个月和 9个月时网膜肿瘤结节（黄色箭头）

此外，研究人员还对这名患者在基线和治疗第15天的肿瘤活检标本进行了全外显子组测序（WES），进一步证实了他的确患有MSI-H型肿瘤，其肿瘤突变负荷甚至高达84 mut/MB。

患者患有MSIH型肿瘤及肿瘤突变负荷

那么，注射iNKT细胞治疗是否真的能够产生效果呢？

有趣的是，研究人员发现在iNKT细胞治疗后，患者体内少数预先存在的T细胞克隆从初始的2%扩增到48%，足足增加了24倍。自动图像分析显示，在iNKT细胞治疗后，CD8+ T细胞广泛浸润到肿瘤中；细胞增殖标记物也表明T细胞在肿瘤内大量扩增。

iNKT细胞治疗下T细胞大量扩增

为慎重起见，研究人员还对患者的基线和治疗第15天的肿瘤活检基因表达进行了分析，结果显示，注射iNKT细胞后，免疫浸润、激活和TH-1极化相关基因表达均大幅度增加，表明iNKT细胞治疗在极大程度上克服了患者对PD-1疗法的耐药性，协助了淋巴细胞的抗肿瘤功能。

肿瘤活检的RNAseq基因表达分析

值得一提的是，尽管在使用Nivolumab治疗期间，患者出现了2级皮疹，但在使用局部类固醇治疗后皮疹有所好转。除此之外，患者未出现任何其他免疫相关不良反应。

综上，该研究展示了iNKT细胞可以作为一种新的免疫治疗方法来克服胃癌免疫治疗耐药问题。相信在不远的未来，iNKT细胞疗法能为胃癌患者提供更好的治疗选择。

来源：

微信公众号: 基因启明

参考文献：

Hadfield MJ, Safran H, Purbhoo MA, Grossman JE, Buell JS, Carneiro BA. Overcoming resistance to programmed cell death protein 1 (PD-1) blockade with allogeneic invariant natural killer T-cells (iNKT). Oncogene. 2024 Mar;43(10):758-762. doi: 10.1038/s41388-024-02948-y. Epub 2024 Jan 29. PMID: 38281989.