INT J LAB HEMATOL：联合allele-specific PCR和淬火探测方法对MYD88基因突变进行检测
2017-04-18 MedSci MedSci原创
在Waldenstörm的巨球蛋白血症和淋巴瘤患者中发现MYD88错义突变c.794T> C，p.Leu265Pro。目前使用直接测序，等位基因特异性PCR（AS-PCR），PCR限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）和高分辨率融合分析（HRM）检测突变。但是，这些方法有的耗时，有的检测灵敏度低。在此，研究人员开发了一种基于淬灭探针（QP）技术和AS-PCR的新型高灵敏度和快速的检测方法。
近日，国际杂志INT J LAB HEMATOL上在线发表一篇关于联合allele-specific
PCR和淬火探测方法对MYD88基因突变进行检测的研究。
在Waldenstörm的巨球蛋白血症和淋巴瘤患者中发现MYD88错义突变c.794T> C，p.Leu265Pro。目前使用直接测序，等位基因特异性PCR（AS-PCR），PCR限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）和高分辨率融合分析（HRM）检测突变。但是，这些方法有的耗时，有的检测灵敏度低。在此，研究人员开发了一种基于淬灭探针（QP）技术和AS-PCR的新型高灵敏度和快速的检测方法。
通过AS-PCR，PCR-RFLP，HRM和QP分析了MYD88突变杂合的淋巴瘤细胞系，两个野生型细胞系和来自Waldenstörm的巨球蛋白血症患者的两个样品，并使用突变体和野生型DNA测定监测灵敏性。
研究结果显示，对于携带突变携带杂合子样品，来自野生型和突变等位基因在QP方法检测中显示出了W型融合谱曲线。与其他方法相似，QP分析在2 h内进行检出限为5％。
然而，AS-PCR和QP（AS-QP）的联合检测方法将突变等位基因灵敏度提高到了0.62％。
研究表明，与AS-PCR相比，AS-QP分析是快速的检测方法，并且最小程度地提高了检测灵敏度。
原始出处：
Shuji Tohda. et.al.
Detection of the MYD88 mutation by the combination of the allele-specific PCR
and quenching probe methods. DOI: 10.1111/ijlh.12598.
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