Neurology：疾病相关的α-突触核蛋白聚集物作为帕金森病临床阶段的生物标志物

蛋白质错误折叠是所有常见的神经退行性疾病最明显的特征，每一种疾病都牵涉到不同的、但又相互重叠的主要蛋白质--。α-突触核蛋白（αSyn）作为突触核蛋白病的致病诱因、疾病标志物和治疗靶点已被广泛研究。帕金森病（PD）的主要诊断标准主要依赖于临床症状的组合，然而神经退行性过程被认为是在观察到明显的临床症状之前许多年就已经开始了。因此，迫切需要在临床症状出现之前识别高危患者。

图1： 论文封面图

近年来，人们在确定特定的疾病标志物和开发早期检测突触蛋白病的诊断工具方面投入了大量的精力，其中许多都集中在检测组织和生物液体中错误折叠的αSyn聚集物。

在为检测αSyn形式而建立的不同检测方法中，酶联免疫吸附试验（ELISA）是一种简单和快速的技术，它允许敏感和特异性地定量分析有关的分析物，并且便于在临床上进行大规模的筛选。尽管大多数为检测αSyn蛋白形式而开发的ELISA检测方法具有较高的分析精度、强有力的实验室间和实验室内的相关性以及良好的可重复性，但在区分PD患者和对照组方面的诊断准确性一直不能令人满意。

在探索αSyn蛋白形式（低聚物和/或聚集物）作为PD和路易体痴呆（DLB）的潜在生物标志物时，已获得令人鼓舞的结果。一些研究表明，仅CSF中的总αSyn不是PD诊断或进展的可靠标志物，这表明αSyn的其他疾病相关形式可能更适合。研究表明，在PD和DLB患者中，CSF中的αSyn低聚物水平持续升高，并与PD运动功能呈正相关。 我们以前描述了几种ELISA检测方法的发展，以检测生物液体中的αSyn低聚物，使用同一抗体进行捕获和检测或构象特异性抗体。

最近的研究表明，种子扩增法（SAAs）有能力检测脑匀浆和CSF样品中的αSyn疾病相关聚集物-。SAAs在区分PD和DLB患者与对照组受试者方面显示出显著的准确性。然而，目前的SAAs主要是二元测试（阳性或阴性），只有半定量的读数，使得它们在监测αSyn聚集物水平在疾病过程中的纵向变化或对治疗的反应方面不够理想。

本研究中探讨的主要研究问题是：将αSyn SAA和寡聚物特异性ELISA结合起来，是否能提供准确和稳健的可测量的测试读数，以反映PD患者的疾病严重程度。人们一直在努力产生这样的信息，或者通过计算SAA动力学参数、端点稀释分析，或者使用参考标准作为解释生物样品中水平的指南 , , , 。然而，目前的αSyn SAA在反映PD的严重程度、临床表型或预后方面仍然不能令人满意。

藉此，英国UCL的Nour Majbour等提出了一份全面的概念验证报告，强调了我们创新的多重测试在提供CSF种子αSyn低聚物水平的强大定量读出方面的临床价值，该水平与疾病阶段相关。

他们将种子扩增试验（SAA）和酶联免疫吸附试验（ELISA）结合起来，以提供一个反映PD患者临床严重程度的定量测试读数。为了实现这一目标，他们首先用两组人脑匀浆（试验组和验证组）探索了我们测试的潜力，然后用两个独立的人脑脊液队列进行了验证；发现组（62名PD和34名对照）和验证组（49名PD和48名对照）。

低聚物特异性ELISA能稳健地定量来自PD或DLB受试者的SAA终末产物，具有较高的敏感性和特异性分数（100%）。分析还表明，用低聚物ELISA作为测试读数而不是单独的SAA，可以更早地检测到播种活动。更重要的是，复用检测提供了关于患者临床疾病阶段的有力信息。

图2：论文结果图

在发现队列中，CSF种子αSyn低聚物的水平与PD临床症状的严重程度相关，这是由UPDRS-运动（r=0.58，p<0.001）和H&Y评分（r=0.43，p<0.01）衡量的。在验证队列中观察到CSF种子αSyn低聚物的浓度与UPDRS-运动（r= 0.50，p <0.01）和H&Y评分（r= 0.49，p <0.01）之间有类似的相关性。

20小时后，ROC分析得出的灵敏度为91.9%（95%CI，82.4%-96.5%），特异性为85.3%（95%CI，69.8 %-93.5%），曲线下面积为0. 在Discovery CSF队列中，用CSF播种的αSyn寡聚体区分PD和对照组的敏感性为969，而用ThT Imax在同一时间点的敏感性为80.7%（95%CI，69.1%-88.5%），特异性为76.5%（95%CI，60.0 %-87.5%），曲线下面积为0.860。

该研究的重要意义在于发现了：结合SAA和ELISA检测比单独的SAA是更有希望的诊断工具，通过与疾病严重程度的临床措施相关联来提供有关疾病阶段的信息。

原文出处
Majbour N, Aasly J, Abdi I, et al. Disease-Associated α-Synuclein Aggregates as Biomarkers of Parkinson Disease Clinical Stage. _Neurology_. Published online September 12, 2022:10.1212/WNL.0000000000201199. doi:[10.1212/WNL.0000000000201199](https://doi.org/10.1212/WNL.0000000000201199)