BMC Oral Health:复合材料修复的抛光方法:对人牙龈成纤维细胞行为的影响
2024-06-26 医路坦克 MedSci原创 发表于上海
伴有牙龈萎缩的龋齿/非龋齿颈部病变可能需要牙科和牙周重建治疗,其中可将瓣/移植物放置在与牙齿填充材料接触的位置。本研究的目的是评估不同抛光技术和氧抑制层(OIL)对牙龈成纤维细胞(HGF-1)的影响。
与牙龈衰退相关的龋齿和非龋齿颈部病变(NCLS)是常见的病理状况,由于牙齿修复和牙周重建方面的原因,其治疗是一项挑战,因为NCLS通常在牙龈边缘以下呈现良好的边缘,或者需要深度边缘抬高。事实上,在处理上述病例时,修复体的最佳抛光是决定性的,以允许牙龈的适当新附着并确保长期成功。事实上,FAP的稳定性是获得软组织愈合和成熟的关键因素。此外,深层边缘提升技术涉及将复合材料放置在牙龈水平以下,使修复边缘更明显且易于隔离。因此,在抛光过程中,重要的是要专注于创造足够的表面,在那里牙龈成纤维细胞可以找到最佳的粘附位置。牙科复合材料(DC)是治疗NCLS的金标准修复材料,很可能是因为它们的美观呈现容易获得,并且允许长时间的手术过程。大量研究已经研究了DC作为化学复杂材料的生物相容性,其中种类繁多的单体和添加剂影响着生物行为。聚合阶段对于避免非聚合单体通过邻近组织或进入口腔引起局部甚至全身反应至关重要。显然,生物相容性主要与材料本身及其聚合后的收缩有关,但某些方面也与主体牙本质的渗透性和残留厚度有关,即使再一次,聚合似乎主要影响结果。事实上,一些体外研究强调聚合反应是永远不会完成的,因此导致未聚合剂的释放不仅在复合定位后的第一阶段,而且在几天后残留的单体也可以全身扩散。通常情况下,在初始聚合后,未反应的单体或添加剂会作为降解因素扩散,因为整个聚合物只有55-65%的反应正常。不完全转换与各种技术参数有关,如固化光的类型、波长、照射时间、填充材料层的厚度等。然而,已经看到氧的存在也可以在直流聚合的程度中起关键作用。氧很容易与自由基发生反应,导致形成一层由未反应单体组成的表面树脂基层,技术上定义为氧抑制层(OIL)。OIL的存在导致聚合物的初始转化率从55-80-35%急剧下降。
为了避免油污的持久性,DC的最终制备可以采用不同的方法,包括使用金刚石橡胶、磨料盘或碳化钨毛刺,这些方法被描述为产生不同的精加工微观模式。近年来,由于细胞成分与细胞外基质(extracellular matrix, ECM)之间的密切关系日益密切,生物材料设计的思维方式发生了变化。细胞/ECM相互作用发生在微/纳米尺度上,而且,由于任何生物材料都可以作为人工ECM,其微观方面指导细胞行为。许多研究都集中在这方面,强调了细胞对不同空间纳米模式的特异性响应能力,并且已经看到不同信号通路的激活(例如细胞骨架构象、细胞形状、运动、增殖等的变化)主要是由于微纳水平的差异。具体而言,在经黏膜水平,与抛光的牙基面上相比,牙龈成纤维细胞被证明能更好地粘附在呈现微结构表面的牙种植基面上,这支持了表面处理技术和制造对软组织细胞反应有很大影响的观点。
考虑到这些前提,我们可以合理地假设,用于修复体的抛光方法可能会产生特殊的纳米-微观轮廓,从而在牙龈成纤维细胞粘附过程中引起不同的生物反应。因此,本研究的目的是评估用于完成DC的抛光技术或OIL的存在如何影响表面特性,如微地形和润湿性,从而影响牙龈成纤维细胞的细胞反应。
方法:采用不同工艺(金刚石橡胶、磨料片和碳化钨毛刺)抛光复合片。另外一组未抛光的光滑组使用和不使用OIL作为对照。通过接触角测量和扫描电镜对样品的亲水性和表面形貌进行了物理表征;然后从细胞毒性和基因表达方面分析HGF-1在不同底物上培养的生物学反应。
G-Aenial前A2 (GC)组成细节
各实验组接触角测量的柱状图,并总结各组间有统计学意义的差异。p= 0007 SM vs. SMG;p< 0.0001 SM vs. AD和SM vs. TCB;DR vs. TCB p<0,0001, DR vs. AD p=0,0019
扫描电子显微镜图像的复合树脂样品在较小(上线)和较大(下线)的放大
图中显示了DR和AD样品上凹槽深度测量的细节。* * p = 0.009
在培养液中浸泡1天和10天后进行间接细胞毒性测定。所有样品均超过对照样品的70%限值,认为生物材料不具有细胞毒性
分析各组在每个实验时间点的发光平均值(归一化为t1)。*p<0.05 AD和DR vs. TCB;$ p<0.001 SMG vs. SM;# p<0.001 AD, DR, TCB vs. SM
(a) Caspase 3基因表达的RT-PCR分析,SM vs. SMG, SM vs. AD, **p<0.05;b细胞周期蛋白依赖性激酶2 (CDK2), SM vs DR **p<0.05, TCB vs SM $ p<0.0001, TCB vs AD, TCB vs SMG§p<0.05;c转化生长因子β (TGF-β), **p<0.05 SM vs. SMG和SM vs. TCB,§p<0.01 SM vs. DR, # p<0.0001 SM vs. AD, $ p<0.05 AD vs. SMG和AD vs. TCB, d白细胞介素6 (IL-6)
结果:表面处理系统导致了润湿性的改变,即使与增殖实验的结果没有成比例的关系,在用一步金刚石橡胶和磨盘抛光的表面上出现了更大的增殖,以及甘油层的直接影响,证实了表面粗糙度可以严重影响HGF-1的生物反应。
结论:表面润湿性以及细胞行为似乎受到用于最后塑造修复的整理系统的选择的影响。特别是,在人牙龈成纤维细胞方面,油的存在是一个负面因素。本研究为修复体直接与软组织细胞接触时复合材料的最佳抛光系统提供了初步的临床指导。了解HGF-1的行为有助于确定抛光治疗直接修复与牙龈衰退相关的龋齿/非龋齿颈部病变
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