暨南大学罗丙红团队Bioact：基于DLP技术打印三维液晶支架揭示类骨质微环境对骨生成的影响

天然类骨质具有独特的液晶态和力学微环境，在指导细胞行为和成骨过程中起着至关重要的作用，因此，仿生构筑具有类骨质微环境的支架材料对于骨缺损治疗具有重要意义。数字光处理（DLP）三维打印技术具有打印精度高和速度快等优势，可实现具有类骨质力学微环境水凝胶的精准打印，但遗憾的是，目前还未见有报道基于DLP打印构建兼有类骨质力学微环境和独特液晶态的液晶支架，根源在于设计具有快速的光交联能力、适宜的粘度、独特的液晶态以及在打印后液晶态在三维上能够良好保持的墨水具有挑战。最近，暨南大学罗丙红教授等人设计了一种新型液晶墨水，并基于DLP技术打印了一类具有类骨质液晶态和力学微环境的三维液晶支架，并籍此揭示了这类新型液晶支架对干细胞成骨分化和骨生成的影响规律，体内实验也充分证明了这类液晶支架优异的促颅骨缺损修复的能力。相关工作以“Creating a Bionic Scaffold via Light-curing Liquid Crystal Ink to Reveal the Role of Osteoid-like Microenvironment in Osteogenesis”为题发表在《Bioactive Materials》。该论文通讯作者为暨南大学罗丙红教授，暨南大学博士研究生刘坤为论文第一作者。

在这一研究工作中，作者首先通过调控天然多糖甲壳素晶须（CHW）液晶和光固化水凝胶基质前驱体（PEGDA）的浓度与配比，设计了一系列具有液晶态和适宜粘度的DLP打印墨水，并基于对墨水流变性能和液晶性的研究，筛选确定了具有不同模量和液晶态的墨水，并通过DLP打印获得了一系列液晶水凝胶支架材料。作者在研究中发现，这类新型可光固化液晶墨水具有良好的可打印性和高的打印精度，通过DLP打印可以快速构建复杂形状和不同尺寸的液晶支架（图1）。

图1 不同组成液晶墨水的性能研究（a~h）与异形件打印（i, j）

随后，研究团队验证了所打印的液晶支架材料具有与类骨质相似的液晶织构和力学特性；并且，通过原子力显微镜的敲击模式测试了液晶支架材料的点模量（图2），支架材料的高低模量的范围分别在39.1~118 kPa和3.4~14.2 kPa，为揭示类骨质的力学特性和液晶态对骨髓间充质干细胞的行为以及成骨性能的影响搭建了合适的材料体系。

图2 DLP打印液晶支架材料的示意图及实物照片（a~c）、液晶性能（d~f）、力学性能（g~i）与形貌（j, k）

该团队通过液晶支架材料的生物学性能评估发现，与低模量液晶支架相比，高模量液晶支架上的骨髓间充质干细胞具有更大的铺展面积、更高的细胞极化和更多的细胞伪足伸展，表明液晶支架材料的模量在调控干细胞的铺展和粘附上发挥着重要作用，更为有趣的是，该团队还发现，同样是高模量环境，细胞在具有液晶态的支架材料上具有更好的细胞铺展和黏附，并且，在低模量环境中，液晶态对细胞铺展则没有明显的促进效果（图3）。体内颅骨缺损修复实验验证了液晶支架材料良好的促进骨生成的能力（图4）。

图3 骨髓间充质干细胞在不同模量和液晶态支架材料上铺展行为和黏附性能

图4 体内颅骨缺损修复实验用于评估不同支架材料的骨修复性能

小结

总之，作者设计了一类全新的液晶墨水，并基于DLP打印技术构建了一类具有类骨质力学微环境和液晶态的液晶水凝胶支架，籍此初步阐明了仿生类骨质微环境对体外骨髓间充质干细胞行为和体内骨生成的影响规律。研究结果表明，较高模量的类骨质微环境有利于干细胞的粘附、扩散和迁移，并通过激活YAP信号通路促进干细胞成骨分化和骨生成，而且，仿生类骨质微环境所呈现的独特液晶态可以强化力学微环境对干细胞行为和骨生成的影响。该研究揭示了液晶支架的力学微环境和液晶态在调节干细胞成骨分化和促骨生成中发挥的重要作用和协同效应，可为仿生构建骨组织工程支架材料提供一定的借鉴。

原文链接：

https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S2452199X24002421?via%3Dihub