一例自身免疫性溶血性贫血强冷凝集的处理办法

前 言

冷凝集是我们工作中常碰到的问题，它会使RBC、HCT比真实值假性降低，MCH、MCHC比真实值假性升高。造成血常规的检验结果不准确、对临床做出错误的引导。对于冷凝集标本处理办法有很多，我们对常用的办法进行比对，经过如下。

案例经过

患儿，女，11岁2月，主诉面色苍黄20余天，腹痛三天，诊断“中度贫血”收治入院。血常规结果如图1，血液状态如图2。

图1 提示冷凝集，标本可见明显冷凝集

图2 血常规标本有细沙状小颗粒凝集现象

立即采取处理办法：

温浴法：标本37.5℃温浴1小时后，HCT，MCHC等参数变化不大。结果如图3

图3 标本37.5℃温浴1小时后

遂采取第二种办法，血浆置换法：

将血常规标本低速离心3-5分钟，用移液管缓缓将上层血浆取出弃去，并记录弃去的量，再加入等量的37℃温浴生理盐水，混匀后再次离心后弃去上清液，按此方法洗涤三遍，最后加入等量的37℃温浴生理盐水，混匀后立马上机测定。血液经生理盐水洗涤后如图4，测定结果如图5。

图4：生理盐水洗涤后的状态

图5 血液洗涤后的测定结果

3.利用RET通道进行冷凝集样本处理的办法：

查看该标本RET相关参数，可以得到RBC-O结果，RBC-O参数为RET通道的红细胞结果，因利用核酸荧光染色法该参数相对于阻抗通道的RBC结果更准确，RBC-O结果为：1.22×1012/L。如图6。

图6 RET相关参数

在Service界面下我们可以得到R-MFV参数，R-MFV（RBC-mostfrequent volume），也就是检测中出现频率最高的红细胞体积，用来比拟MCV，统计学分析二者并无差异。R-MFV：145.9fL。如图7。

图7 Service界面下R-MFV参数

这样我们就得到了相对准确的RBC结果及MCV结果，由于冷凝集对HGB影响不大，故HGB结果参考测量结果，通过计算公式：

MCV（红细胞平均体积）=HCT/RBC

MCH（平均红细胞血红蛋白含量）=HGB/RBC

MCHC（平均红细胞血红蛋白浓度）=HGB/HCT

计算得HCT为17.8%，MCH为40.98pg，MCHC为280.9g/L

根据以上三种方法，各参数对比如下表1。

表1 各种办法之间的对比

注：使用Ret模式才会出现RBC-0及R-MFV等参数

各分析项目的数值单位分别是，RBC为×1012/L；HCT为%；MCV为fl；MCH为pg；MCHC为g/L；

本以为就能直接发报告，碰巧那天工程师在，便向他请教，随即他介绍了另一种算法：RBC-He作为RET通道实测平均红细胞血红蛋白含量，经统计与MCH有很好的相关性（统计1000例非冷凝集样本检测了CBC+RET的数据，得出RBC-He和MCH的相关性），RBC-He是MCH的0.9201倍。对RBC-He进行修正得到更加准确的MCH结果，R-MFV作为红细胞直方图出现频率最高位置的体积，近似于MCV，由这两个参数可以和实测的HGB结合起来计算得到其他红细胞相关参数。

如上案例RBC-He为36.7pg，通过换算公式，得出MCH为40.78pg，与上面方法换算的MCH40.98pg相差不大，故若将RBC-He调整到和MCH同一水准，便可以直接使用RBC-He替代MCH。

案例分析

RET检测通道需将染色温度升高至41℃，可在短时间内使红细胞解聚，得到RBC-O结果，RBC-O参数为RET通道的红细胞结果，因利用核酸荧光染色法该参数相对于阻抗通道的RBC结果更准确，再根据计算公式，得出相应的红细胞相关参数结果。

当然，基于引起红细胞冷凝集的因素，温浴或血浆置换是纠正红细胞冷凝集的标准方法，但当温浴无法很好解决的冷凝集标本，而血浆置换操作过程的繁琐以及置换难以掌控而造成血液细胞成分的部分丢失情况下，可以考虑采用RET通道研究参数计算方法，不仅能提高检验效率，也能缩短门、急诊标本TAT时间。

平时工作中碰到的冷凝集病例，基本通过温浴或血浆置换都能纠正过来，但这例患者通过这两种方法没得到很好的效果，跟踪检查后发现，这是一例自身免疫性溶血性贫血继发支原体感染患者。

红细胞冷凝集是一种现象，冷凝集聚集程度与冷凝集效价呈正相关［2］。冷凝集素(CAs)是一种红细胞自身抗体，主要为IgM型，少部分是IgG和IgA型，这些抗体在31℃以下温度时易与红细胞上的I、i或SP13种抗原结合造成红细胞凝集［3］，从而干扰红细胞计数和红细胞相关参数的分析，如红细胞压积(HCT)、平均血红蛋白含量(MCH)和平均血红蛋白浓度(MCHC)。

引起红细胞冷凝集的因素有：

1. 支原体感染。
2. 传染性单核细胞增多症、重症贫血、骨髓瘤、肝硬化等疾病也可以有阳性反应。
3. 自身免疫性溶血性贫血的患者可能继发支原体肺炎，冷凝集素滴度阳性（如此病例）。
4. 受外界环境温度影响，秋冬季节为冷凝集高发季节。

总 结

红细胞冷凝集是一个可逆的过程，在血细胞分析中我们发现有些患者的红细胞易发生冷凝集现象，根据国际血液学标准化委员会推荐的复检规则第13条规定，平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)超过正常上限20g/L时，要求检查标本是否有脂血，溶血，凝集及球形红细胞。

根据这条规则可发现标本冷凝集现象或其他的一些异常标本。冷凝集会使RBC、HCT比真实值假性降低，MCH、MCHC比真实值假性升高。造成血常规的检验结果不准确、对临床做出错误的引导。故对于MCHC>380的标本，还需检验同道们多加注意，避免造成临床误诊。