Immunol Invest ：金属硫蛋白-1增加与痛风活性和痛风石有关

背景：痛风是一种慢性炎症性疾病，被认为是40岁以上男性最常见的炎症性关节炎形式。来自亚洲、欧洲和北美的流行病学调查显示，痛风发病率为0.6 - 2.9 / 1000人年，成人患病率为0.68-3.90%。痛风是由尿酸钠（MSU）晶体引起的关节和周围组织炎症引起的。MSU晶体的形成是由于过量摄入富含嘌呤的食物/饮料和各种健康因素，如肥胖、心脏病和/或肾脏疾病，导致血清UA浓度高于生理饱和。高尿酸血症是发生痛风的主要危险因素，但有趣的是，只有约10%的高尿酸血症患者出现痛风症状。

显然，IL-1β在痛风炎症的发展中起着关键作用，IL-1β抑制剂的临床试验证实了这一点，试验表明，IL-1β抑制剂可有效持续减少痛风关节炎的复发。MSU晶体释放活化IL-1β的相关途径相当复杂，其机制尚不清楚。大多数观点认为MSU晶体沉积在关节和周围组织中，激活NLR家族含3 pyrin结构域(NLRP3)的炎症小体，引发caspase-1的高活性。这一过程导致活性形式IL-1β，IL-18的产量增加。

然而，另一项实验表明，激活的IL-1β的分泌是FFA与TLR2的相互作用，TLR2与MSU晶体协同作用，通过caspase-1和含有CARD (ASC)的适配器分子凋亡相关斑点样蛋白诱导激活的IL-1β的释放，而不是依赖于NALP3的人PBMC和小鼠巨噬细胞。IL-6可诱导IL-1β前体和NLRP3的表达，IL-6诱导的MSU晶体诱导细胞中IL-1β的产生显著增加，这些结果进一步被IL-6抑制剂tocilizumab证实。与单独刺激MSU晶体相比，TNFα和MSU晶体也观察到中性粒细胞中IL-1β分泌上调的协同效应。也有报道MSU与ROS协同刺激活化IL-1β的释放。

总的来说，沉积在关节和周围组织中的MSU晶体刺激关节内的滑膜细胞、巨噬细胞和其他细胞激活NALP3炎性小体，分泌IL-6、TNF-α，产生ROS，并可能加上循环的FFA，活性IL-1β的释放升高是它们与MSU晶体之间错综复杂的相互作用的结果。激活的IL-1β诱导IL-8将痛风发作的主要炎症细胞中性粒细胞招募到炎症关节区，中性粒细胞产生蛋白酶-3，将IL-1β前体加工为激活形式，形成正反馈环路，进一步分泌大量IL-8，吸引大量中性粒细胞涌入关节关节和关节周组织，加剧炎症，导致痛风发作。

目的：本研究旨在检测痛风患者血清MT-1水平，并探讨其与疾病活动性、并发症、临床指标及㼿炎性细胞因子的相关性。

方法：采用实时聚合酶链反应（RT-PCR）和酶联免疫吸附试验（ELISA）检测痛风患者外周血单核细胞中MT-1 mrna的表达及血清MT-1水平。采用Spearman相关检验分析MT-1与痛风临床指标及血清炎症介质的相关性。

结果：与健康对照（hc）相比，活动性痛风患者外周血单核细胞中MT-1 mRNA和血清中MT-1蛋白水平较高，尤其是痛风患者伴有痛风石。血清MT-1水平在无痛风的非活动性痛风患者、hcc和无痛风的高尿酸血症患者之间无明显差异，肾损害痛风患者与hcc之间也无明显差异。与hc相比，活动性痛风患者血清IL-1β、IL-6和IL-8水平显著升高，尤其是活动性痛风伴痛风石患者。痛风患者血清MT-1与CRP、IL-1β、IL-6、IL-18呈正相关，与尿酸（UA）、ESR、CREA无相关性。

表1 痛风、高尿酸血症和肥胖症患者的人口学和临床特征

图1 痛风患者与无痛风的高尿酸血症和HC患者MT1mRNAs和蛋白水平的比较。(A)用RT-PCR方法检测49例痛风患者、17例无痛风的高尿酸血症患者和43例健康人外周血单个核细胞MT1mRNA的表达。(2)用双抗体夹心法测定49例痛风患者、17例无痛风高尿酸血症患者和43例高尿酸血症患者血清MT-1蛋白水平。每个符号代表一个单独的患者和HC。水平线表示中间值。两组间差异采用单因素方差分析多重比较。

图2 痛风活动期患者㼿表达明显高于肥厚型痛风患者，尤其是痛风活动期伴TOPHI患者。(A)采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测痛风活动期(AG)患者(n=27)、非活动期痛风(InAG)患者(n=22)和健康对照组(HC)(n=43)外周血单个核细胞(PBMCs)中MT1mRNA的表达，用RT-PCR检测活动期痛风患者(AG-)(n=19)和痛风活动期(AG+)和HC(n=43)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中MT1mRNA的表达；(C)用双抗体夹心法测定AG(n=27)、inAG(n=22)和HC(n=43)患者血清MT-1蛋白水平，(D)用ELISA法检测AG-(n=19)、活动期AG+(n=8)和HC(n=43)患者血清MT-1蛋白水平

结论：MT-1在活动期痛风患者中表达上调，且与C反应蛋白、促炎细胞因子IL-1β、IL-6、IL-8呈正相关。鉴于MT-1在慢性非感染性炎症性疾病中具有抗炎、抗氧化应激能力，因此，活动期痛风患者升高的MT-1可能作为免疫介质抑制痛风急性发作时的炎症反应。

原文出处： 

Ma Y,  Yin Z,  Dai H,et al.Increased Metallothionein-1 Associated with Gout Activity and Tophi.Immunol Invest 2023 Jan 31