非小细胞肺癌I期临床表明：iNKT细胞疗法对于非小细胞肺癌耐受性良好，疗效显著！

亮点

1.非小细胞肺癌患者体外扩增的iNKT细胞对肿瘤仍然具有较高杀伤力，并产生大量IFN-γ以响应免疫应答。

2.患者静脉注射自体体外扩增iNKT细胞后，经α-GalCer刺激，产生IFN-γ的能力极大增强。

3.近70%的患者经iNKT细胞疗法后病情稳定，所有患者未出现1级以上不良事件。

肺癌是临床常见的恶性肿瘤之一，新发病例及死亡病例均在逐年上升，是目前世界范围内死亡率最高的恶性肿瘤。非小细胞肺癌(NSCLC)是肺癌中最常见的类型，约占肺癌总数的85%。在我国，约有70%的NSCLC患者确诊时已是肺癌晚期。

自然杀伤T细胞（NKT）是CD1d限制性的先天类T细胞，同时表达T细胞受体和NK细胞标记。恒定NKT（iNKT）细胞是人类NKT细胞的主要群体，在人体内表达恒定的Vα24JαQ，并以CD1d依赖性方式被α-半乳糖基神经酰胺（α-GalCer）激活，可产生大量细胞因子，从而激活其他抗肿瘤效应细胞。

近期，一项题为A phase I study of in vitro expanded natural killer T cells in patients with advanced and recurrent non-small cell lung cancer的I期临床研究表明，通过静脉注射自体体外扩增的iNKT细胞，能够大幅增长循环中iNKT细胞数量，促进IFN-γ的产生，增强自身免疫细胞的应答能力，经此疗法的大多数患者病情稳定，具有较好的安全性。

这项研究共招募了6名非小细胞肺癌患者，其中包括4名腺癌患者和2名鳞状细胞癌患者，根据表现患者被等额分为I级患者和II级患者。所有患者均接受了外周血白细胞分离术，以收集外周血单个核细胞（PBMC）。随后，研究人员从他们的外周血中制备活化的iNKT细胞。

患者概况

流式细胞术分析表明，新鲜分离的PBMCs含有极少量的Vα24+Vβ11+ NKT细胞（仅为0.06%）。已有研究报道，在健康志愿者和癌症患者中，αGalCer和IL-2会促进iNKT细胞的体外扩增。惊喜的是，在研究人员人为的外源施加αGalCer和IL-2后，Vα24+Vβ11+ NKT细胞竟果真得到了大量“繁殖”——6名患者的 iNKT细胞扩增率在第14天增长了1290倍，在 21天更是增长了2380倍！

流式细胞术分析Vα24+Vβ11+ NKT细胞占比及细胞增长曲线

那么，扩增后的iNKT细胞是否同样具有功能性呢？研究人员从细胞毒性及细胞因子角度进行了功能评估。他们发现，经α-GalCer和IL-2活化的iNKT细胞对人类肿瘤细胞系表现出极为高效的细胞毒性；此外，它们还能产生大量的IFN-γ和少量的IL-4，以响应下一次的免疫应答。

体外扩增的iNKT细胞的细胞毒性

活化的iNKT细胞产生的细胞因子

基于此，研究人员对每位患者分别注射了自体体外扩增的iNKT细胞（以下简称iNKT细胞疗法），其中I级患者注射剂量为1 × 107个/m2 ，II级患者注射剂量为 5 × 107个/m2，随后对每位患者外周血中iNKT细胞的数量进行了密切监测。

结果表明，1名I级患者在第35至49天，循环中iNKT细胞大幅增多；2名II级患者在第21天和第28天，循环中的iNKT细胞数量有所增加。然而，除了1名患者的NK细胞数量在第28天略有增加外，大多数患者的NK细胞数量没有明显变化。

患者循环中iNKT细胞和NK细胞水平

同时，研究人员还评估了患者循环中iNKT细胞产生IFN-γ的能力。在α-GalCer刺激后，将近70%的患者产生IFN-γ的细胞数量大幅度增加，其中更是有部分患者在第一次注射αGalCer后就立即产生IFN-γ，以响应免疫应答，这充分展现了iNKT细胞疗法的高效。

iNKT细胞疗法下患者PBMC中产生IFN-γ的细胞数量

最后，研究人员对这6位患者治疗后的病情进行了评估。从胸部X线检查和计算机断层扫描结果来看，4名患者病情稳定，2名患者疾病进展。更令人欣慰的是，iNKT细胞疗法在任何患者中均未观察到重大（>2 级）毒性或严重副作用，一些诸如发热、心律失常等1级不良事件均会随着时间的推移消退，不会影响患者的正常生活。

每位患者观察到的不良事件

综上所述，这项针对NSCLC患者的I期临床研究提示我们，iNKT细胞疗法对于非小细胞肺癌的治愈具有好的效果，相信在不久的将来，iNKT细胞疗法必将为更多的癌症患者带来曙光。

来源：

微信公众号：基因启明

参考文献：

Motohashi S, Ishikawa A, Ishikawa E, Otsuji M, Iizasa T, Hanaoka H, Shimizu N, Horiguchi S, Okamoto Y, Fujii S, Taniguchi M, Fujisawa T, Nakayama T. A phase I study of in vitro expanded natural killer T cells in patients with advanced and recurrent non-small cell lung cancer. Clin Cancer Res. 2006 Oct 15;12(20 Pt 1):6079-86. doi: 10.1158/1078-0432.CCR-06-0114.