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Skin Health:肿瘤坏死因子- α、白细胞介素- 17和白细胞介素- 22对聚丝蛋白- 2和角蛋白表达的影响:三维银屑病皮肤模型分析

2024-12-08 从医路漫漫 MedSci原创 发表于陕西省

本文利用三维银屑病皮肤模型,研究肿瘤坏死因子α (TNF - α)、IL - 17A和IL - 22对FLG2和HRNR表达的影响。

银屑病生物治疗的最新进展揭示了肿瘤坏死因子- α (TNF - α)、白细胞介素(IL) - 23p19和IL - 17A轴在银屑病发病中的重要作用。与干扰素(IFN)‐α、IFN‐γ、IL‐12和IL‐22也有相关报道S100融合型蛋白家族成员(cornulin, filaggrin [FLG], filaggrin‐2 [FLG2], hornerin [HRNR], repetin, trichohyalin和trichohyalin‐like 1)位于染色体1q21.3.2,其中FLG2和HRNR与FLG具有许多相同的特性,包括密切相关的结构组织,相似的氨基酸组成和类似的蛋白水解过程。因此,HRNR和FLG2与FLG一样,被认为在表皮屏障形成中起作用,先前的研究报道了FLG在银屑病皮损中的表达显著降低。我们之前报道了S100融合型蛋白在三维(3D)特应性皮炎皮肤模型中的表达改变,该模型是通过重组IL - 4和IL - 13刺激3D皮肤等效物产生的该3D模型可用于评估细胞因子对表皮结构形成和分化相关蛋白表达的直接影响。因此,我们利用银屑病皮肤3D模型研究了TNF - α、IL - 17A和IL - 22对FLG2和HRNR表达的影响,以阐明FLG2和HRNR在银屑病皮肤中的作用

方法:在本研究中,我们制作了一个3D银屑病皮肤模型,用TNF‐α, IL‐17A和IL‐22刺激3D皮肤等效物。利用该模型,我们通过定量逆转录聚合酶链反应和免疫染色检测FLG2和HRNR的表达变化。

定量RT - PCR引物

银屑病皮肤三维模型的组织学表现及细胞因子表达。(a) 3D皮肤模型的组织学结果。比尺:100 μm(血红素和伊红染色,原始放大倍数400°)。(b)通过定量RT - PCR分析3D皮肤模型中CCL20、CXCL8、S100A7和IL - 36α的相对mrna,并归一化为β - actin值。所有数据均为三个独立实验的均值SD。*p < 0.05;**p < 0.01;***p < 0.001;****与3D对照皮肤模型相比p < 0.0001。对照组:3D对照皮肤模型,pso: 3D银屑病皮肤模型,TNF: 3D TNF‐α皮肤模型,IL‐17:3D IL‐17A皮肤模型,IL‐22:3D IL‐22皮肤模型。

T改变了银屑病皮肤3D模型中FLG‐2和HRNR的表达。(a)用抗FLG2和抗FLG抗体双染色3D皮肤模型。虚线表示颗粒层和角质层的分界。比例尺:100 μm(原放大倍数400°)。(b)用抗HRNR和抗FLG抗体染色3D皮肤模型。虚线表示颗粒层和角质层的分界。比例尺:100 μm(原放大倍数400°)。(c)通过定量RT - PCR分析3D皮肤模型中FLG、FLG2和HRNR的相对mrna,并归一化为β - actin值。所有数据均为三个独立实验的均值SD。*p < 0.05;**p < 0.01;***p < 0.001;****与3D对照皮肤模型相比p < 0.0001。对照组:3D对照皮肤模型,pso: 3D银屑病皮肤模型,TNF: 3D TNF‐α皮肤模型,IL‐17:3D IL‐17A皮肤模型,IL‐22:3D IL‐22皮肤模型。RT‐PCR,逆转录聚合酶链反应

结果:3D银屑病皮肤模型中FLG2和HRNR的表达较3D对照皮肤明显降低。TNF - α、IL - 17A和IL - 22刺激后,FLG2的表达显著降低。相比之下,与3D对照皮肤相比,IL - 22刺激显著增加了HRNR的表达,尽管TNF - α或IL - 17A略有降低。

结论:TNF‐α、IL‐17A和IL‐22对FLG2和HRNR表达及表皮结构形成有不同的影响。此外,FLG2和HRNR可能在银屑病的屏障形成和发病机制中发挥不同的作用。

原文来源:

Makino T;  Mizawa M;  Takemoto K; Effect of tumour necrotic factor-α, interleukin-17 and interleukin-22 on the expression of filaggerin-2 and hornerin: Analysis of a three-dimensional psoriatic skin model.Skin Health Dis 4(6)

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